Análise De Alimentos

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Após o cálculo, prepara-se o meio:

- Pesa-se, em balança, a massa necessária de VB em um copinho de café;

- Mede-se 90 mL de água destilada em uma proveta;

- Acrescenta-se água destilada no copinho de café com VB e, consequentemente, transfere-se tudo para o Erlenmeyer;

- Leva-se o sistema ao micro-ondas e deixa-se tempo suficiente para homogeneizar o meio;

- Retira-se o meio do micro-ondas e faz-se a distribuição de 9 mL do mesmo para cada um dos 9 tubos (usado no experimento), após isso tampa-se os mesmos com uma boneca ou com uma tampa apropriada, deixando-as levemente frouxas.

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Figura 2 - VB em tubo de ensaio.

3° Meio: Caldo EC (EC)

De início, calcula-se o necessário para o preparo de 90 mL de EC, como demonstrado abaixo:

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Após o cálculo, prepara-se o meio:

- Pesa-se, em balança, a massa necessária de EC em um copinho de café;

- Mede-se 90 mL de água destilada em uma proveta;

- Acrescenta-se água destilada no copinho de café com EC e, consequentemente, transfere-se tudo para o Erlenmeyer;

- Leva-se o sistema ao micro-ondas e deixa-se tempo suficiente para homogeneizar o meio;

- Retira-se o meio do micro-ondas e faz-se a distribuição de 9 mL do mesmo para cada um dos 9 tubos (usado no experimento), após isso tampa-se os mesmos com uma boneca ou com uma tampa apropriada, deixando-as levemente frouxas.

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Figura 3 - EC em tubo de ensaio.

4° Meio: Água Peptonada

Primeiramente, executa-se o cálculo necessário para o preparo de 250 mL de Água Peptonada, como demonstrado abaixo:

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Após o cálculo, prepara-se o meio:

- Pesa-se, em balança, a massa necessária de Água Peptonada em um copinho de café;

- Mede-se 250 mL de água destilada em uma proveta;

- Acrescenta-se água destilada no copinho de café com Água Peptonada e, consequentemente, transfere-se tudo para o Erlenmeyer;

- Leva-se o sistema ao micro-ondas e deixa-se tempo suficiente para homogeneizar o meio;

- Retira-se o meio do micro-ondas e faz-se a distribuição de 225 mL do mesmo para um frasco coletor e 9 mL para cada um dos 2 tubos (usado no experimento), após isso tampa-se os mesmos com uma boneca ou com uma tampa apropriada, deixando-as levemente frouxas.

- Autoclavagem do Material

A autoclave é um aparelho muito utilizado em laboratórios de pesquisas e hospitais para a esterilização de materiais. O processo de autoclavagem consiste em manter o material contaminado em contato com um vapor de água em temperatura elevada, por um período de tempo suficiente para matar todos os microrganismos, no qual é apresentado abaixo:

- Liga-se o aparelho na tampa de 200 v e verifica-se o nível de água que deve ficar um dedo abaixo do suporte do cesto;

- Liga-se o termostato no máximo e arruma-se o material no cesto até o limite do mesmo;

- Fecha-se a tampa do aparelho com cuidado, pois é muito pesada e fecham-se os manípulos cruzadamente (um de frente para o outro);

- Abre-se o parafuso de pressão e aguarda-se o gotejamento e a saída do chiado característico, quando isso ocorrer fecha-se o parafuso de pressão e aguarda-se atingir a temperatura de trabalho no monômetro de 121°C;

- Abre-se e fecha-se o parafuso de pressão para a retirada do ar residual e passa-se o termostato para o médio, começa-se a contar o tempo de 15 minutos para material limpo e embrulhado e 30 minutos para material sujo;

- Verifica-se se a pressão (temperatura) se mantém estável, caso não ocorra dá-se leves toques no contrapeso para estabilizar;

- Terminado o tempo, desliga-se o aparelho e abre-se o parafuso de pressão bem devagar até zerar o monômetro;

- Abrem-se os manípulos e a tampa pela lateral com cuidado para não se queimar;

- Retira-se o material da autoclave e leva-se o que for necessário para a estufa de secagem.

- Coleta da Amostra

Na Capela de Fluxo Laminar:

- Separa-se o material necessário: Bebida Láctea (Din-Din)

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Figura 4 – Din-Din (Sabor: Chocolate) (Leite+Achocolatado)

- Mede-se a quantidade necessária (25 mL) em proveta;

- Inoculação

1ª Fase: Separação das Concentrações – Água Peptonada

Leva-se todo o material necessário à capela de fluxo laminar e começa-se o procedimento:

- Abre-se o frasco coletor contendo 225 mL de Água Peptonada e, transferem-se as 25 mL de Bebida Láctea medida em proveta para o mesmo;

- Homogeneíza-se a mistura e, consequentemente, identifica-se o frasco, sendo este denominado o de concentração 10-1;

- Transfere-se 1 mL do frasco contendo a concentração 10-1 para um tubo contendo 9 mL de Água Peptonada, designado como concentração 10-2;

- Transfere-se 1 mL do frasco contendo a concentração 10-2 para um outro tubo contendo 9