Seminário Direito do Consumidor

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2. Materiais e Métodos

Foi avaliada a atividade antimicrobianaa de cimentos e pastas usados para o curativo de tratamento de canal (Tabela 1) através do método de difusão de ágar usando poços ou pontos de papel absorvente.

As cepas bacterianas (Tabela 2) foram utilizadas da American Type Culture Collection, exceto a Streptococcus mutans, pois essa foi obtida através da saliva de um paciente na clínica dental, que foi isolada no laboratório de Microbiologia da Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo (Brasil).

O inóculo foi obtido através da semeadura das cepas no ágar MHb (Müller Hinton medium) e o ágar BHIa (Brain Heart Infusion ágar), conforme as características fisiológicas e incudabas a 37ºC para 24 horas.

O método do poço foi conduzido em placas de duas camadas em triplicado. A primeira camanda, base, foi composta por 10,0ml de meio de cultura esterilizado e foi aquecido aproximadamente a 50ºC em placas de petri estéreis de 20x100mm. Após solidificação, adicionou-se uma camada de sementes de 5,0ml, obtida através da adição do inóculo numa concentração de 106 colônias formadoras unidades/ml. Em seguida, os poços foram realizados através da remoção do ágar em alguns pontos equidistantes. Os cimentos e pastas foram aplicados em cada um poços até ser preenchido totalmente, no qual foram feitos conforme as instruções do fabricante.

O método usando pontos de papéis absorventes foram feitos em placa de petri de 20x100mm com 12,0ml de semente, como no método do poço. Após a solidificação, os pontos de papel absorvente foram imersos nos cimentos e nas pastas, e colocados em pontos equidistantes.

As placas foram mantidas à temperatura ambiente durante 2 horas para pré-disposição do material, e após foram incubadas a 37ºC durante 24 horas. Em seguida, foi adicionados para otimização uma porção de 5,0ml de gel TTC preparado com 1% de ágar (Difco) e 0,05% de cloreto de trifeniltetrazólio. Após a solidicação, as placas foram incubadas a 37ºC durante 30 minutos.

A zona de inibição ao redor dos poços ou ao longo do pontos de papéis absorventes foram medidas no maior ponto com régua milimétrica.

Tabela 1: Cimentos e pastas avaliadas no estudo

MATERIAL

COMPOSIÇÃO

SEALAPEX

Óxido de cálcio, sulfato de bário, sílica, dióxido de titânio, estearato de zinco

FILL CANAL

Pó: Protóxido de zinco, resina hidrogenada, sulfato de bário, borato de sódio anidro

Líquido: eugenol, óleo de amêndoa

KETAC ENDO

Composição não disponível

AH-PLUS

Pasta A-Resina epóxica, tungsteneato de cálcio, óxido de zircônio, aerosil, óxido de ferroPasta B-Amina adantamantada, N,N-Dibencil-5-oxanonano-diamina-1,9, TCD-Diamina, tungsteneato de cálcio, óxido de zircônio, óxido de silicone

CALEN

Hidróxido de cálcio, óxido de zinco, colofônia, polietilenoglicol 400

CALASEPT

hidróxido de cálcio, cloreto de sódio, cloreto de potássio, cloreto de cálcio, bicarbonato de sódio, água destilada

ÓXIDO DE ZINCO

Óxido de zinco, água destilada

3. Resultados

Os testes realizados para verificar a atividade antimicrobiana nos cimentos e pastas apresentaram os dados que podem ser vistos nas tabelas 3 e 4. As tabelas 3 e 4 apresentam os diâmetro e largura média da inibição obtidos através do método do poço e da aplicação nos materiais através de papéis absorventes. Na figura 1, encontra-se os halos de inibição da bactéria Micrococcus luteus, no qual foi utilizado o método de papel absorvente (Figura 1A) e após a otimização (Figura 1B).

Tabela 2: Microorganismos utilizados como indicadores de atividades antimicrobiana

MICROORGANISMOS

ORIGEM

MEIO DE CULTURA

Inóculo

Teste

BACTÉRIAS GRAM-POSITIVAS

Micrococcus luteus

ATCC 9341

MHb

MH

Staphylococcus aureus

ATCC 25923

MHb

MH

Staphylococcus epidermidis

ATCC 12228

MHb

MH

Enterococcus faecalis

ATCC 10541

BHI

BHIa

Streptococcus mutans

WS

BHI

BHIa

BACTÉRIAS GRAM-NEGATIVAS

Escherichia coli

ATCC 25922

MHb

MH

Pseudomonas aeruginosa

ATCC 27853

MHb

MH

Tabela 3 : Diâmetro médio dos halos inibidos (mm) formado por cimentos e pastas pelo método do poço

MATERIAIS

MICROORGANISMOS

M. luteus