A PROPRIEDADES DOS AMINOÁCIDOS

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Procedimento 02: REAÇÃO XANTOPROTÉICA

- Colocar em um tubo de ensaio 2 mL de solução de albumina de ovo.

- Adicionar 1 mL de ácido nítrico concentrado. Observar.

- Aquecer em banho-maria à ebulição, observar o que ocorre com a cor do precipitado e anotar: BRANCO

- Resfriar a solução e alcalinizar com excesso de solução de NaOH 10 N.

O teste realizado caracteriza a presença de ENZIMAS nos aminoácidos e proteínas.

- Repetir o teste utilizando uma solução de fenol.

- Observar e comparar os resultados obtidos:

SOLUÇÃO COM FENOL, FORMOU-SE UMA SOLUÇÃO TURVA ESBRANQUIÇADA

Procedimento 03: REAÇÃO DE AMINOÁCIDOS SULFURADOS

- Colocar em um tubo de ensaio 2 mL de solução de albumina de ovo.

- Adicionar 1 mL de solução de NaOH 2,5 N e 1 mL de solução de acetato de chumbo II.

- Aquecer e registrar suas observações:

FORMOU-SE UM SOLUÇÃO DE COLORAÇÃO ESCURA

Esta reação caracteriza-se pela liberação de H2S. De aminoácidos e proteínas que contenham enxofre na sua molécula.

O precipitado de cor ESCURA, forma-se através da seguinte reação:

Pb2+ + S2- PbS[pic 3]

Os aminoácidos que dão esta reação são: R + CNO2H4

Procedimento 04: REAÇÃO DO BIURETO.

- Colocar em um tubo de ensaio 2 mL de solução de albumina de ovo.

- Adicionar 2 mL de NaOH 2,5 N. Misturar bem.

- Adicionar, gota a gota, 1 mL de solução de sulfato de cobre II.

Observar a cor que desenvolve e anotar SOLUÇÃO ROXA

A reação do biureto é positiva para PROTEÍNAS e negativa para AMINOÁCIDOS

Procedimento 05: TESTES COM SOLUÇÃO DE GELATINA

Repetir os testes anteriores com uma solução de gelatina. Anotar os resultados:

Testes

Solução de gelatina

Millon

AMARELO

Xantoprotéica

LARANJA ESCURO

Aminoácidos sulfurados

AMARELO

Biureto

LILÁS

Procedimento 06: ENSAIO DO ANEL DE HELLER

- Colocar em um tubo de ensaio 4 mL de solução de proteína (clara de ovo ou gelatina).

- Adicionar, lentamente escorrendo pelas paredes do tubo de ensaio 1 mL de ácido nítrico concentrado. Cuidar para que as duas soluções não se misturem. Observar a zona de separação das duas fases obtidas. Anotar.

FORMOU-SE UMA FASE BRANCA E OUTRA AMARELA

- O teste de Heller é muito sensível e é utilizado para a pesquisa de albumina na urina.

Procedimento 07: AÇÃO DE SAIS DE METAIS PESADOS SOBRE PROTEÍNAS.

- Pegar dois tubos de ensaio e adicionar a cada um deles 3 mL de solução de proteína ( clara de ovo ou gelatina)

- Ao primeiro tubo adicionar, gota a gota, 2 mL de solução de acetato de chumbo. Observar e anotar.

FORMOU-SE PRECIPITADO BRANCO

- Ao segundo tubo adicionar, gota a gota, 2 mL de nitrato de prata.

FORMOU-SE UM PRECIPITADO INCOLOR

Questões para discussão:

- Por que o ácido nítrico produz manchas amarelas quando em contato com a pele?

O ÁCIDO NÍTRICO CONCENTRADO COLORE A PELE HUMANA DE AMARELO DEVIDO À UMA REAÇÃO COM A QUERATINA. ESTA COR AMARELA TORNA-SE LARANJA QUANDO NEUTRALIZADA. AS QUEIMADURAS DA PELE IGUALMENTE PRODUZEM MANCHAS AMARELO-ACASTANHADAS, SÃO DOLOROSAS E PODEM ACOMPANHAR-SE DE FORMAÇÀO DE BOLHAS OU LESÕES NECRÓTICAS QUE APROFUNDAM-SE PROGRESSIVAMENTE

- Por que a clara de ovo pode ser empregada como antídoto de certas substâncias tóxicas, como, por exemplo, sais de chumbo e mercúrio?

POR QUE OS CÁTIONS DE METAIS PESADOS COMO HG2+, PB2+, CU2+, FE2+, CD2+ E ZN2+ FORMAM PRECIPITADOS INSOLÚVEIS DE PROTEÍNAS, DENOMINADOS DE ACORDO COM O ELEMENTO FORMADOR COMO O PROTEINATO DE MERCÚRIO, PROTEINATO DE CHUMBO. ESSA PRECIPITAÇÃO É MAIS INTENSA QUANDO O PH ESTÁ ACIMA DO PONTO ISOELÉTRICO (PI). ISSO PORQUE, ACIMA DO PI, A CARGA LÍQUIDA SOBRE A PROTEÍNA É NEGATIVA, FAVORECENDO A INTERAÇÃO COM OS CÁTIONS PROVENIENTES DO SAL.

- Por que a reação do Biureto é negativa para aminoácidos em geral?

PORQUE A REAÇÃO DO BIORETO É NEGATIVO PARA AMINOÁCIDOS EM GERAL, SERVE PARA IDENTIFICAR PROTEÍNAS

RESULTADOS E DISCUSSÕES

Reação de Millon

A reação se dá devido à presença do grupamento hidroxifenil nas moléculas de proteínas e peptídeos. A reação é positiva para tirosina com o aparecimento de cor avermelhada com ou sem precipitado. As proteínas são precipitadas pelos ácidos minerais fortes e pelo mercúrio, os quais com aquecimento tornam uma coloração avermelhada.

Reação do Biureto

Esta reação é utilizada para verificar a presença de peptídeos com 3 ou mais resíduos de aminoácidos. As proteínas ou peptídeos, quando tratados por uma solução diluída de sulfato de cobre em meio alcalino (solução de biureto), apresentam uma coloração roxa, que é característica.