CONSIDERAÇÕES GERAIS DE SEGURANÇA NO LABORATÓRIO

...

Identificação de alguns componentes da matéria viva

Introdução

Organismos vivos complexos se originam de elementos simples como: C, H, O, N, P e S. Estes elementos se unem para formar diferentes tipos de biomoléculas como: carboidratos, lipídeos, aminoácidos (proteínas) e ácidos nucleicos (DNA e RNA). O conjunto destas moléculas em interação, envoltas em uma membrana adequada, torna-se uma célula – a unidade básica da vida.

Estas biomoléculas apresentam distintas funções dentro dos organismos vivos, desde armazenamento (de informação – DNA, ou de energia – carboidratos e lipídeos), estrutural (formação de membranas – lipídeos e proteínas, e outras estruturas – como exemplo parede celular de celulose) e também atuam como combustível energético (carboidratos, lipídeos, proteínas).

Objetivo

Identificar as principais biomoléculas presentes em diferentes matrizes biológicas.

Procedimento A: Identificação de glicídios redutores

- Preparar uma série de tubos de ensaio contendo 1,0 mL de cada amostra citada na Tabela 1 (identificar os tubos).

- Adicional 2,0 mL do reagente de Benedict em cada tubo de ensaio contendo as respectivas amostras e ferver durante 1 minuto. Observar se houve mudança de cor (anotar o resultado na Tabela 1).

[pic 8]

O que é um açúcar redutor?

Açúcares redutores são aqueles em que os grupos aldeídos podem ser oxidados para gerar o grupo carboxila, que é característico dos ácidos. Essa reação é a base de teste para a identificação de aldoses. Quando grupo aldeído é oxidado, algum agente oxidante precisa ser reduzido. As aldoses são chamadas de açúcares redutores por causa desse tipo de reação; cetoses também poder ser açúcares redutores porque se isomerizam a aldoses.

Observações:

a) o resultado pela reação da glicose ou frutose deverá ser usado como padrão para verificar a presença de glicídio redutor

b) as amostras que estiverem no estado sólido devem ser dissolvidas em água destilada, conforme indicação: Farinha de trigo, maizena e açúcar – dissolver 2,0g das amostras em 10 mL de água destilada. Mamão, fígado e batata – macerar 5,0g da respectiva amostra e misturar 20 mL de água destilada, filtrar a amostra com o auxílio de gaze.

Tabela 1: Identificação de glicídeos redutores

Material Biológico

Cor apresentada

1) Água

2) Frutose

3) Glicose

4) Farinha

5) Maisena

6) Fígado

7) Mamão

8) Clara de ovo

9) Sacarose (açúcar)

10) Leite de soja

11) Suco de laranja

12) Leite integral

[pic 9]

Discussão: As oses reagem com o íon cúprico, cedendo facilmente seus elétrons. Na presença deste aceptor de elétrons, a reação se completa pela formação de um precipitado vermelho telha, o óxido cuproso.

[pic 10]

A redução do cobre ocorre somente com as aldoses, contudo, algumas cetoses também podem sofrer oxidação, pois no equilíbrio dinâmico das soluções aquosas contendo os açúcares podem coexistir aldeídos não cíclicos (compostos que reagem com íon cobre) e cetonas hidroxílicas. É esse fenômeno que permite a identificação da frutose (cetose) pelo reagente de Benedict. Essas reações desempenham papéis fundamentais para a identificação de açúcares.

Observação: o reagente de Benedict é constituído por uma solução de sulfato de cobre II + carbonato de sódio + citrato de sódio cristalizado, onde o íon Cu2+ encontra-se sob forma de um complexo com íon citrato. Simultaneamente com a oxidação do açúcar redutor dá-se a redução do íon Cu2+ a Cu+ (precipitado vermelho telha).

Questões:

- Em quais alimentos você identificou a presença de glicídeos redutores? Desenhe a fórmula estrutural dos açúcares redutores encontrados no experimento.

- Explique o que ocorreu quando houve mudança de cor.

Procedimento B: Identificação de polissacarídeos de reserva energética

- Cortar uma fatia de batata e colocar em um vidro relógio, em seguida adicionar algumas gotas de lugol sobre a fatia. Observar o resultado e anotar na Tabela 2.

- Utilizando o resultado observado no item anterior como padrão, testar a presença de polissacarídeos nas demais amostras, conforme descrito no item seguinte.

- Preparar uma série de tubos de ensaio contendo 1,0 mL de cada amostra citada na Tabela 2 (identificar os tubos), adicionar em cada tubo 3 gotas de lugol e agitar os tubos. Observar e anotar os resultados na Tabela 2.

[pic 11]

O que é um polissacarídeo de reserva?

Polissacarídeos de reserva são formados por monossacarídeos unidos por ligações glicosídicas. Estes polissacarídeos são de fundamental importância pois armazenam moléculas de altamente energéticas que são liberadas quando às células precisam de energia. O amido é o polissacarídeo de reserva dos vegetais enquanto que o glicogênio é o das células animais.

Tabela 2: Identificação de polissacarídeos de reserva energética

Material Biológico

Cor apresentada

1) Água

2) Frutose

3) Glicose

4) Farinha

5) Maisena

6)