ATIVIDADES PRATICAS SUPERVISIONADAS

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Palavras chave: Aspartato aminotransferase, Piridoxial fosfato, Alanina aminotransferase

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2 ABSTRACT

Enzymes are catalytic proteins present in the biological system. It has a high degree of specificity on its substrates accelerating specific reactions without being altered or consumed during the process. The study of enzymes has immense clinical importance. In some diseases, the activities of certain enzymes are measured mainly in blood plasma, erythrocytes or tissues. The enzymes present in the body are synthesized intracellularly.

The aminotransferases catalyze the transfer of an alpha-amino group from an amino acid to an alpha-keto acid, forming novel alpha-amino and alpha-keto acid. Pyridoxial phosphate is a biological cofactor used by transaminases and the International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine (IFCC) recommend its use during the dosing of these enzymes.

Aspartate aminotransferase (AST) and alanine aminotransferase (ALT) are examples of aminotransferase of clinical interest. AST, both in mitochondrial form and in cytoplasmic form, is found mainly in the heart: liver, skeletal muscle and kidney. ALT, exclusively cytoplasmic, is found primarily in the liver and kidney.

The supplementation of the pyridoxial phosphate transmission reactions guarantees the complete use of the enzymes during their dosing, avoiding diminished activities in samples with coenzyme deficiency. This situation may occur in individuals who are deficient in vitamin B6, such as patients on renal dialysis, transplanted patients with liver disease or myocardial infarction, as well as alcoholics and apparently healthy individuals over 64 years of age.

Determination of the concentration of these enzymes in serum can provide important information about the severity and stage of a heart injury, for example. The GOT and GPT determinations can also be used to assess whether individuals exposed to chloroformic carbon tetrachloride or other industrial solvents have hepatic lesions since such solvents can cause liver degeneration by releasing various enzymes into the bloodstream.

Keywords: Aspartate aminotransferase, Pyridoxial phosphate, Alanine aminotransferase

3 INTRODUÇÃO

3.1ENZIMAS

As enzimas são proteínas com propriedades catalisadoras sobre as reações que ocorrem nos sistemas biológicos. Elas têm um elevado grau de especificidade sobre seus substratos acelerando reações específicas sem serem alteradas ou consumidas durante o processo. O estudo das enzimas tem imensa importância clínica. Em algumas doenças as atividades de certas enzimas são medidas, principalmente, no plasma sanguíneo, eritrócitos ou tecidos. Todas as enzimas presentes no corpo humano são sintetizadas intracelularmente.

Três casos se destacam:

3.2 Enzimas Plasma-Específicas

Enzimas ativas no plasma utilizadas no mecanismo de coagulação sangüínea e fibrinólise.

Ex.: pró-coagulantes: Trombina, fator XII, fator X e outros.

3.3 Enzimas Secretadas

São secretadas geralmente na forma inativa e após ativação atuam em locais extracelulares. Os exemplos mais óbvios são as proteases ou hidrolases produzidas no sistema digestório.

Ex.: lipase, amilase, tripsinogênio, fosfatase ácida prostática e antígeno prostático específico. Muitas são encontradas no sangue.

3.4 Enzimas celulares

Normalmente apresentam baixos teores séricos, mas os níveis aumentam quando são liberadas a partir de tecidos lesados por alguma doença. Isto permite inferir a localização e a natureza das variações patológicas em alguns órgãos, tais como: fígado, pâncreas e miocárdio. A elevação da atividade sérica depende do conteúdo de enzima do tecido envolvido, da extensão e do tipo de necrose.

Nelson, David L.; COX, Michael M. Princípios de bioquímica de Lehninger. Porto Alegre: Artmed, 2011. 6. ed. Porto Alegre: Artmed, 2014.

São exemplos de enzimas celulares: transaminases, lactato desidrogenases etc.

MOTTA, valter T. Bioquimica clinica para o laboratório: princípios e interpretações. 4ed. São Paulo: Robe Editorial,2003.

As meias-vidas das enzimas teciduais após liberação no plasma apresentam grande variabilidade – nos casos de enzimas medidas com propósitos diagnósticos e prognósticos, podem variar desde algumas horas até semanas. Em condições normais as atividades enzimáticas permanecem constantes, refletindo o equilíbrio entre estes processos. Modificações nos níveis de atividade enzimática ocorrem em situações onde este balanço é alterado.

A utilidade diagnóstica da medida das enzimas plasmáticas reside no fato que as alterações em suas atividades fornecem indicadores sensíveis de lesão ou proliferação celular. Estas modificações ajudam a detectar e, em alguns casos, localizar a lesão tecidual, monitorar o tratamento e o progresso da doença. No entanto, muitas vezes falta especificidade, isto é, existem dificuldades em relacionar a atividade enzimática aumentada com os tecidos lesados. Isto porque as enzimas não estão confinadas a tecidos ou órgãos específicos, pois estão grandemente distribuídas e suas atividades podem refletir desordens envolvendo vários tecidos.

Nelson, David L. Princípios de bioquímica de Lehninger/David L. Nelson.

Na prática, a falta de especificidade é parcialmente superada pela medida de vários parâmetros (que incluem várias enzimas). Como as concentrações relativas das enzimas variam consideravelmente em diferentes tecidos, é possível, pelo menos em parte, identificar a origem de algumas enzimas. Por exemplo, apesar das enzimas transaminases ALT (TGP) e AST (TGO) serem igualmente abundantes no tecido hepático, a AST (TGO) apresenta concentração 20 vezes maior que a ALT (TGP) no músculo cardíaco. A determinação simultânea das duas enzimas fornece uma clara indicação da provável localização da lesão tecidual. A especificidade enzimática pode também ser aumentada pela análise das formas isoenzimáticas