Família Enterobacteriaceae Compreende os Bacilos Gram-negativos.

...

Prova de uréia: A prova consiste em transferir uma porção do crescimento bacteriano com uma alça para o meio contendo uréia, pH neutro e um indicador de pH, o vermelho fenol.

Provas de produção de H2S: para este teste, inocula-se a bactéria no meio SIM que tem o tiossulfato como fonte de enxofre e o sulfato ferroso como indicador da produção de sulfeto de hidrogênio, com o auxílio de uma alça em agulha.

Provas de produção de indol: A prova é realizada inoculando-se o meio contendo excesso de triptofano. Após a incubação colocar 0,5 ml do reagente de Kovac ou o reativo de Ehrlich através da parede interna do tubo.

Prova de motilidade: A prova é efetuada inoculando-se em linha reta, através da técnica da punctura (com agulha), 2/3 de um meio semi-sólido.

Em todas essas provas, após inoculação nos meios, deve-se incubar em estufa à temperatura e por período de tempo adequados, para posterior interpretação dos resultados. Seguindo da identificação da bactéria, utilizando para isso a tabela de bactérias fermentadoras de glicose.

Antibiograma ou TSA: Deve-se espalhar o inóculo de maneira uniforme sobre a placa (grande), garantindo que nenhum espaço fique vazio. Fazer o cultivo em meio líquido, padronizar e mergulhar um swab.Passar o swab em todas as direções em uma placa contendo ágar Mueller Hinton.Colocar os discos contendo os antibióticos a serem testados com o auxílio de uma pinça. Esperar crescer e medir o halo de inibição.

- RESULTADOS E DISCUSSÃO

Prova de citrato: positiva, pois ocorreu a mudança da cor original do meio para azul marinho. O CO2 produzido pela bactéria reagiu com o sódio do citrato formando carbonatos de reação alcalina, e o indicador de bromotimol virou para azul.

Prova de uréia: positiva, em razão da alteração da cor original do meio, para rosa pink. A amônia produzida pela bactéria reagiu formando carbonato de amônia que alcaliniza o meio.O indicador de pH é o vermelho de fenol, que em meio alcalino tomou a coloração pink.

Prova de produção de H2S: positiva, uma vez que o meio SIM virou para a cor preta. O H2S que é incolor, produzido pela bactéria reagiu com o ferro (indicador) formando um precipitado preto (sulfeto ferroso).

Prova de Indol: negativo, já que não foi detectada a presença do indol através da reação com reagente de Kovac, que é amarelo, não havendo a formação de um anel vermelho. Constatando que a bactéria não possui habilidade em produzir indol.

Prova de motilidade: positiva, posto que se observou o aspecto turvo do meio, indicando que houve o crescimento bacteriano no interior do meio, por todo o tubo.

Antibiograma ou TSA: Formou-se um halo ao redor dos discos dos antibióticos, mostrando que a bactéria é sensível a todos os antibióticos testados, com exceção da nitrofurantoína, evidenciando a não difusão do antibiótico impregnado em disco de papel de filtro, através de um meio sólido,não inibindo o crescimento microbiano, uma vez que o tamanho do halo desenvolvido indicou resistêcia.

- CONCLUSÃO

As provas realizadas demonstraram que é possível identificar bactérias através de testes bioquímicos com uma boa precisão. A partir do perfil enzimático da colônia fornecida, comparando com dados na tabela de bactérias fermentadoras de glicose, foi possível determinar a espécie bacteriana, Citrobacter freundiii. Todos os testes foram compatíveis com a bactéria identificada.

Os resultados obtidos com base na medida do diâmetro do halo formado em volta dos discos, mostraram que a Citrobacter freundiii, é resistente à Nitrofuratoína (NIT300), pois não apresentou halo em volta do disco, e se mostrou sensível aos demais antibióticos testados, apresentando um halo em torno do disco.