Determinação de Açúcares Redutores no Mel

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[pic 1]

Após terem sido preparados os tubos de ensaio com as concentrações de glicose e água destilada, adicionou-se o reativo cupro-alcalino com o objetivo de fazer com que a glicose reduzisse os íons cúpricos à íons cuprosos do reativo cupro-alcalino. Os tubos foram levados ao aquecimento por 30 minutos à 100ºC para que a glicose (açúcar redutor) pudesse reduzir o Íon Cu+2 em Cu+1 ( observado pela cor vermelho/tijolo na imagem abaixo ).

[pic 2]

Figura 1 - Após aquecimento da glicose com o reativo cupro-alcalino observa-se o vermelho/tijolo formado.

Os açúcares redutores das amostras em questão, aquecidos em meio alcalino, transformam-se em Enodióis que reduzem o Íon Cúprico presente no reativo de Somogyi, a Íon Cuproso. As amostras foram colocadas para aquecimento para acelerar essa reação, e a formação do óxido cuproso.

Após o aquecimento, e esfriamento. Adicionou-se o segundo reativo arseno-molíbdico

O Óxido Cuproso (Cu2O), assim formado, reduz o composto Arsênio-Molibídico para Óxido de Molibdênio de coloração azul cuja intensidade de cor é proporcional a quantidade de açúcares redutores existentes na amostra. Como demonstrado na figura abaixo:

[pic 3]

Figura 2 – Após adição do reativo arseno-molíbdico

Os 4 primeiros tubos de ensaio, que serão base para a curva de calibração, contêm seguintes concentrações (g/mL) de glicose.[pic 4]

1

2

3

4

8,3

16,7

25

33,3

Encontradas da seguinte forma:

Cálculo da concentração:

Cada amostra contém um volume um total de 3 mL. Através da equação:

[pic 5]

Exemplo: Calculando concentração da amostra 3.

[pic 6]

[pic 7]

[pic 8]

*OBS1 é a concentração da solução de glicose preparada. 0,75mL é o volume coletado da solução de glicose. E 3mL é o volume total da amostra. C2 = concentração final.[pic 9]

As demais concentrações foram encontradas com a mesma equação.

[pic 10]

[pic 11]

[pic 12]

[pic 13]

[pic 14]

[pic 15]

[pic 16]

[pic 17]

[pic 18]

As concentrações foram encontradas porque serão necessárias para o cálculo da curva de calibração. Sabe-se através da lei de Lambert - Beer que existe uma relação linear crescente entre a Absorbância e a Concentração da solução. Portanto, após serem encontradas todas as concentrações foram feitas as leituras de absorbância no fotocolorímetro, e os resultados foram os apresentados abaixo:

Absorbância grupo 1

Absorbância grupo 2

Absorbância grupo 3

Absorbância grupo 4

Absorbância média

Absorbância média - branco

Concentração de Glicose (ug/mL)

Tubos de ensaio

-

609

480

533

540,6666667

364,3333333

8,3

1

-

1117

920

985

1007,333333

831

16,7

2

1403

1454

1446

1122

1356,25

1179,916667

25

3

1798

1585

1925

1462

1692,5

1516,166667

33,3

4

-

170

157

202

176,3333333

N.A.

-

5 - branco

1263[pic 19][pic 20]

1318

1141,666667

24,52028517

6

1373

6

Tabela 1 – Valores das absorbâncias de todas as equipes/grupos e média desses valores.

Ao utilizarmos a média dos valores