A TECNOLOGIA EM BIOCOMBUSTÍVEIS

...

Fizemos a assepsia na alça de platina, deixando ela sobre a chama do bico de Bunsen até ficar com a coloração avermelhada e em seguida esperamos o se resfriamento.

Colocamos sobre uma lamina uma gota da suspensão bacteriana utilizando para isso a alça de platina. Com a alça de platina espalhamos ligeiramente o material, logo em seguida secamos a preparação ao ar.

Fixamos o esfregaço e passamos a lamina três vezes na chama do bico de Bunsen, cobrimos o esfregaço com solução de cristal violeta (Gram 1) e deixamos atuar por 1 minuto.

Escorremos o corante e lavamos o esfregaço com agua destilada, cobrimos com lugol (Gram 2) e deixamos atuar por 1 minuto.

Em seguida lavamos novamente e descoramos com álcool-cetona (Gram 3) em tempo delicado, lavamos novamente após o uso de álcool-cetona.

Cobrimos o esfregaço com solução de fucsina ou safranina (Gram 4) por 30 minutos.

Escorremos lavamos e secamos ao ar, em seguida examinamos com imersão 100 % com uma gota de óleo de imersão (conforme mostra a Figura 1).

Assim que terminamos de examinar a amostra, descartamos os resíduos gerados em agua corrente pois é inerente.

- Figura 1 [pic 2]

,

[pic 3]

3.5 RESULTADOS E DISCULSÕES

Nas bactérias Gram-positivas a parede celular é formada principalmente por ácidos teicóicos, e nas bactérias Gram-negativas é formada principalmente por lipídeos. Por possuírem grande quantidade de ácidos teicóicos, após a coloração, as Gram-positivas formam um complexo corado azul intenso, que não é removido facilmente com álcool-acetona. As gram-negativas não retém a coloração após o tratamento com álcool-acetona e são reveladas posteriormente com solução de fucsina ou safranina, apresentando-se na coloração avermelhada. Em nosso experimento foram analisadas apenas as bactérias Gram-negativas, conforme as figuras 2 e 3 a seguir.

-Figura 2 -Figura 3[pic 4]

[pic 5]

4. CONCLUSÃO

Todos os passos e procedimentos necessários para o método de coloração de Gram foram feitos, seguindo à risca o módulo. Os objetivos foram alcançados, pois conseguimos obter a visualização das bactérias Gram-negativas, pois não havia nenhuma bactéria Gram-positiva em nossa amostra.

5. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

http://www.portalsaofrancisco.com.br/biologia/coloracao-de-gram ACESSO EM 25/10/2017

https://pt.wikipedia.org/wiki/T%C3%A9cnica_de_Gram ACESSO EM 25/10/2017

http://www.provida.ind.br/site/index.php/bacterias/bacterias/122-tecnica-de-gram.html ACESSO EM 25/10/2017

LIBERTO, M. I. M.; CABRAL, M. C.; LINS, U. G. C. (2006). Microbiologia.V.1. 2. ed. Rio de Janeiro: Fundação Cecierj, 2006. 62,63,64,65 pp. ACESSO EM 25/10/2017