EXTRAÇÃO DE PIGMENTOS DE FOLHAS DE BETERRABA E ANÁLISE DO EXTRATO POR CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA
Por: Kleber.Oliveira • 10/3/2018 • 1.850 Palavras (8 Páginas) • 1.302 Visualizações
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Os principais pigmentos das folhas de beterraba são o betacaroteno e as betaxantinas (cor amarela) e as clorofilas a e b (cor verde).
O betacaroteno é o que possui menor polaridade e, assim sendo, presume-se que seja a mancha amarela que corre em mesma velocidade que o solvente (Rf=~1). As betaxantinas são bem mais polares e se presume que sejam as mancha amarela mais próxima ao ponto de aplicação, pois quanto maior a polaridade do pigmento maior a afinidade com a sílica e menos o pigmento percorrerá a placa.
Ainda se considerando as polaridades, presume-se que mancha verde de maior Rf corresponde à clorofila a, enquanto que a mancha que se desejava extrair da placa corrresponde à clorofila b. As clorofilas a e b se diferenciam por um grupamento metano na clorofila a que se encontra na posição em que há um aldeído na clorofila b. A clorofila b interage mais com a fase estácionária que a clorofila a, percorrendo menos a placa que esta.
Cor da banda
Pigmento
da (cm)
ds (cm)
Rf
amarelo
xantofila
1,4
5,0
0,28
verde-bandeira
clorofila a
2,3
5,0
0,46
verde musgo
clorofila b
3,9
5,0
0,78
verde musgo isolado da cromatoplaca de CCDP
clorofila b
3,8
5,0
0,76
amarelo
β-caroteno
5,0
5,0
1,0
[pic 1]
Figura 1: CCD em cromatoplaca 20 x 5 cm do extrato concentrado de folhas de beterraba.
4.2 CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA ANALÍTICA
Desejava-se extrair tão somente a clorofila b, porém se verificou a presença de 3 manchas no extrato do pigmento isolado. A clorofila b é mais polar que a clorofila a (que corre mais, sendo a mancha verde escura logo abaixo da amarela que é o betacaroteno que é a primeira mancha de cima para baixo, a clorofila a é a segunda mancha que se vê e em seguida a clorofila b) e é encontrada em menor concentração nas plantas.
Cor da banda
Pigmento
da (cm)
ds (cm)
Rf
amarelo
xantofila
1,8
11,0
0,16
verde-bandeira
clorofia a
3,2
11,0
0,29
verde musgo
clorofila b
6,0
11,0
0,54
amarelo
β-caroteno
8,7
11,0
0,79
[pic 2]
Figura 2: CCD em cromatoplaca 5 x 5 cm de uma fração isolada por CCDP (acima)
5. DISCUSSÃO
Foi possível encontrar na literatura que os principais componentes coloridos das folhas de beterraba são o β-caroteno e as xantofilas, de coloração amarela; e as clorofilas a e b, de coloração verde. Suas estruturas estão representadas a seguir:
β-caroteno:
[pic 3]
Xantofila:
[pic 4]
Clorofila a e b:
[pic 5]
R = CH3 para clorofila a e R = CHO para clorofila b
Pela análise das estruturas destes componentes, é possível notar que aquele que possui natureza menos polar é o β-caroteno, de cadeia carbônica insaturada. A este componente é razoável atribuir então a mancha amarela mais intensa.
A outra mancha amarela, correspondente à xantofila, tem natureza muito mais polar, devido a presença de dois grupos hidroxila nas extremidades da cadeia carbônica de sua estrutura. Essa molécula é capaz de interagir fortemente com a sílica (a fase estacionária), por meio de ligações de hidrogênio, tendo sua corrida na cromatoplaca limitada a um pequeno deslocamento. As manchas verdes, referentes às clorofilas a e b, podem ser diferenciadas pelo grupamento R. A clorofila a, que tem como substituinte na posição β-pirrólica uma metila (um grupo apolar), tem menos afinidade pela fase estacionária, sendo a mancha verde-bandeira. A outra mancha verde, de coloração verde-musgo, corresponde à clorofila b, que tem como substituinte um grupamento aldeído, que a torna mais polar. Assim, esta interage mais com a sílica, e possui menor deslocamento na cromatoplaca.
De acordo com estas atribuições, o componente isolado pela nossa equipe foi a clorofila b, de natureza mais polar e de coloração verde-musgo. Isto explica a dificuldade em solubilizar a amostra no solvente diclorometano após sua raspagem da cromatoplaca.
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