CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA

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A cromatografia em camada delgada (CCD) foi feita utilizando-se como fase sólida (adsorvente) cromatoplacas tipo high performance thin-layer chromatography (HPTLC) de sílica gel. A fase móvel utilizada foi o metanol. A ativação da placa foi feita em estufa (100°C) antes da sua utilização. Anteriormente à realização da Cromatografia, foram colocados 100µL de cada amostra em um ependorff e colocado um 1mL do líquido extrator (éter clorofórmico 9:1). Após isso, deixou-se descansar por 4 minutos, formando duas fases: orgânica (material biológico) e inorgânica (líquido extrator com analito), em seguida, se retirou-se o líquido extrator e se colocou em outro ependorff, que ficou 24 horas em banho-maria. Depois de evaporado, se ressuspendeu com 100µL de acetona e se aplicou na placa com auxílio de um microcapilar. O resultado foi negativo para a presença de chumbinho nas duas amostras biológicas analisadas.

CONCLUSÃO

Durante a execução das aulas práticas da disciplina PIAP VIII, foi possível observar que são muitas as técnicas de qualificação e quantificação de uma amostra biológica e que a escolha desta depende do conhecimento do profissional acerca do histórico do indivíduo/animal que sofreu a intoxicação e das caraterísticas físico-químicas do analito. Sem esses conhecimentos, as técnicas seriam escolhidas erroneamente. Além disso, ficou claro que muitas técnicas servem apenas para triagem, não tendo poder de decisão sobre um diagnóstico como, por exemplo, os testes rápidos. Em contrapartida, a CCD, apesar de também ser qualitativa, se mostra como uma alternativa viável de análise com finalidade diagnóstica ou forense em medicina veterinária e humana.

REFERÊNCIAS

KLAASSEN, C. D.; WATKINS III, I. B. Fundamentos em toxicologia. Porto Alegre: AMGH, 2012.

NETTO, J. Z., CAZETTA, J. O. Cromatografia Plana, FunepFunep, Jaboticabal, 2005

BRAGA, G.L. Introdução a Métodos Cromatográficos. 6ª Edição

COLLINS, C.H.; BRAGA,G.L.; BONATO,P.S. Fundamentos de Cromatografia. São Paulo: da Unicamp, 2006. 456p.