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Análise por Cromatografia líquida de gel filtração

Por:   •  7/10/2018  •  814 Palavras (4 Páginas)  •  404 Visualizações

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...

[pic 2]

Figura 1: Separação dos componentes durante o processo cromatográfico

- Resultados

TABELA:

λ: 620 (ABS)

λ: 560 (ABS)

1

-0,011

-0,026

2

0,008

0,008

3

-0,013

-0,013

4

-0,018

-0,017

5

0,047

0,032

6

0,026

-0,004

7

0,014

-0,019

8

0,066

0,048

9

0,044

0,037

10

0,042

0,112

11

0,029

0,207

12

0,026

0,278

13

-0,010

0,216

14

-0,018

0,118

15

0,008

0,072

16

-0,008

0,022

17

0,021

0,038

18

-0,001

0009

19

0,008

0,013

20 (Branco)

0

0

Tabela 1: Absorbâncias lidas de cada cubeta nos dois comprimentos de onda

[pic 3]

Gráfico 2: Cromatograma das absorbâncias lidas em cada fração

- Resina Sephadex

É um polímero com poros muito pequenos para permitir a entrada apenas de moléculas pequenas e é um composto sólido que quando é misturado a um líquido e empacotado torna-se esse gel. Depois de utilizada, a resina deve ser guardada em azida sódica, por ser um agente microbriano, para preservar a vida útil dela.

- CLGF x CLAE

Cromatografia líquida em gel filtração é um método clássico e rudimentar com pouca eficiência, entretanto os resultados obtidos foram satisfatórios, pois foi possível separar os dois compostos e visualizar essa separação. A cromatografia líquida de alta eficiência como o próprio nome diz possui maior eficiência e, em condições favoráveis, obtêm resultados com uma alta qualidade, porém não é possível ver a separação, pois é o instrumento que a realiza.

Em relação ao cromatograma não é possível identificar uma linha base plana e constante por falta de uma linearidade das absorbâncias lidas nas cubetas que não continham nenhum dos dois corantes decorrente ao mal estado que se encontram essas cubetas que podem interferir na medição do espectrofotômetro.

- Seletividade e Sensibilidade

É possível identificar em qual dos dois comprimentos de onda foi mais seletivo e sensível. No comprimento 560 se obtêm pico para os dois analitos, no entanto o pico do vermelho de fenol é maior por ser seu lâmbida máximo. O 620, porém, apresenta pico apenas para o azul de dextran, logo ele é mais seletivo por fazer leitura apenas de um corante e é mais sensível pois o pico do azul é maior nesse comprimento do que no 560.

- Conclusão

O objetivo da prática foi alcançado, uma vez que foi possível obter e visualizar a separação dos analitos, analisar a metodologia utilizada e os critérios de separação. Entretanto, há hoje métodos de separação e análise mais sofisticados, que proporcionam maior eficiência e qualidade,

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