RELATÓRIO DE ANÁLISES TOXICOLÓGICAS

...

A3 II REF II

[pic 22][pic 23]

Adicionar 2mL do Adicionar 2mL do

Reagente Ehrlich Reagente Ehrlich[pic 24][pic 25]

Aguardar 10 min Aguardar 10 min[pic 26][pic 27]

Transferir para Cubeta Transferir para Cubeta

de vidro de vidro[pic 28][pic 29]

Realizar leitura ƛ=553 nm Zerar (espectrofotômetro)[pic 30][pic 31]

Anotar valor da Absorbância Realizar leitura ƛ=553 nm[pic 32]

Anotar valor da Absorbância

4.2 Padrão

B I 2 I 5 I 10 I 20 I 30 I

[pic 33] [pic 34] [pic 35] [pic 36] [pic 37] [pic 38][pic 39][pic 40][pic 41][pic 42][pic 43][pic 44]

1mL 0,96mL(960µL) 0,90mL(900µL) 0,80mL(800µL) 0,60mL(600µL) 0,40mL(400µL) de água de água de água de água de água de água

+0,04 (40µL) +0,1mL(100µL) +0,2 (200µL) +0,4mL (400µL) +0,6mL (600µL

de padrão de padrão de padrão de padrão de padrão

[pic 45][pic 46][pic 47][pic 48][pic 49][pic 50]

[pic 51][pic 52]

Adicionar 1mL de tampão acetato

[pic 53]

Adicionar 200µL(0,2mL)

Acetoacetato de etila

[pic 54]

Agitar por 5 segundos[pic 55]

Formação do Complexo

ALA-pirrol[pic 56]

Banho fervente por 10 min[pic 57]

Esfriar com água da torneira

[pic 58]

Adicionar 3mL Acetato de etila

[pic 59]

Centrifugar por 3 min para

separação da fase orgânica[pic 60]

Retirar 2mL da fase orgânica

(superior) e transferir para outros

tubos

[pic 61]

[pic 62][pic 63][pic 64][pic 65][pic 66][pic 67][pic 68]

B II 2 II 5 II 10 II 20 II 30 II

[pic 69] [pic 70] [pic 71] [pic 72] [pic 73] [pic 74]

B II 2 II 5 II 10 II 20 II 30 II

[pic 75] [pic 76] [pic 77] [pic 78] [pic 79] [pic 80]

[pic 81][pic 82][pic 83][pic 84][pic 85][pic 86]

[pic 87][pic 88]

Adicionar 2mL do

Reagente Ehrlich[pic 89]

Aguardar 10 min[pic 90]

Transferir para Cubeta

de vidro[pic 91]

Zerar com B II (espectrofotômetro)[pic 92]

Transferiu cada amostra para Cubeta

de vidro e realizou-se a leitura =553 nm para cada uma[pic 93]

Anotar valores das Absorbâncias

- Resultados

Concentração (mg/L)

Absorbância 1

Absorbância 2

0

0

0

02

0,040

0,148

05

0,066

0,300

10

0,844

0,774

20

1,626

1,496

30

1,955

0,972

Para a plotagem do gráfico e realização da curva com melhor resultado, foram utilizados os valores da absorbância 2, sendo que o valor da concentração de 30mg/L foi descartado para obter-se um R² de valor considerával.

Gráfico: Curva de Calibração Absorbância x Concentração (mg/L)

[pic 94]

Cálculos para determinação do ALA

- Abs da amostra 3 = 0,840

y = 0,0758x – 0,0173

0,840 = 0,0758x - 0,0173

0,0758x = - 0,0173 – 0,840

x = 11,310 mg/L

Cálculos para determinação de creatinina

- Amostra 3

11,310 mg ALA/L 1,5 g/L creatinina[pic 95]

x 1 g/L creatinina[pic 96]

x= 7,54 mg ALA/ g creatinina

[pic 97][pic 98]

VR ALA= 4,5 mg ALA/ g creatinina

VR