ANÁLISE DA COLORAÇÃO DE GRAM

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• Microscópio óptico;

• Óleo de imersão.

Procedimento:

O leite fermentado Chamyto foi agitado e aberto, assim como a alça bacteriológica plástica (descartável) de 10 microlitros que se encontrava estéril em gral cirúrgico. A alça plástica foi inserida na embalagem com movimentos circulares com o intuito de retirar o determinado volume do produto, após isso a amostra foi colocada sobre a lâmina de vidro com movimentos circulares, formando assim um esfregaço. Dessa forma, um pequeno volume foi distribuído sobre a lâmina para ser analisado.

O bico de Bunsen foi aceso e a lâmina de vidro foi passada em movimentos rápidos sobre a chama, afim de fixar o material na lâmina. Após esta fixação ter sido feita, o procedimento para Coloração de Gram foi realizada.

A lâmina foi colocada em uma estante e foi iniciado o processo. O primeiro passo foi adicionar gotas de Cristal Violeta sobre a lâmina e aguardar um minuto, após isso a lâmina foi levada até o fundo da pia e com água corrente para retirada do excesso de Cristal Violeta.

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[pic 3]

Após isso, adicionou-se Lugol sobre a lâmina e assim como o passo anterior foi aguardado um minuto para retirada do excesso em água corrente.

[pic 4]

O terceiro passo foi adicionar Álcool/Acetona na lâmina e aguardar aproximadamente 45 segundos.

[pic 5]

Após a lavagem para retirada do excesso de Álcool/Acetona, foram adicionadas gotas de Fucsina e aguardou-se um minuto para que as colorações das GRAMs negativas fossem concluídas, retirando sempre o excesso em água corrente após cada etapa.

[pic 6]

Após secagem da lâmina, a mesma foi visualizada em microscópio.

IV - Resultados e Discussão:

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Durante a análise no microscópio óptico não foram encontrados micro-organismos presentes no leite fermaentado Chamyto. De acordo com a literatura, deveria ter sido possível a visualização de Lactobacillus paracasei na amostra analisada.

Uma justificativa para a não visualização pode ter sido a amostragem realizada. Possivelmente em maior quantidade, seria feita a visualização.

V – Conclusão

Pode-se concluir que possivelmente há pouca concentração de micro-organismos por amostra analisada de Chamyto.