ROTEIRO DE AULAS PRÁTICAS MICROBIOLOGIA GERAL

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3. Colocar a lâmina preparada na platina do microscópio e com objetiva 10X em posição de foco, abaixar o canhão do microscópio por meio de parafuso macrométrico até o aparecimento da imagem. Com o parafuso micrométrico, ajustar a sua nitidez.

4. Sem mover o canhão e a platina do microscópio, mudar para a objetiva de aumento 45X. Se houver necessidade, ajustar a iluminação e o foco.

FOCALIZAÇÃO COM OBJETIVA DE IMERSÃO

1. Retirar o microscópio da caixa. Colocá-lo sobre a mesa cuidadosamente.

2. Ligar a lâmpada.

3. Suspender o condensador ao máximo. Abrir todo o diafragma. Verificar se o campo do microscópio está bem iluminado.

4. Colocar a lâmina, com uma gota de óleo de cedro sobre o esfregaço na platina do microscópio.

5. Baixar o canhão do microscópio de modo a mergulhar a objetiva de imersão no óleo. Suspender o canhão do microscópio por meio de parafuso macrométrico até o aparecimento da imagem e, com o parafuso micrométrico ajustar a nitidez.

Aula prática nº 1

Título: Ubiqüidade dos Micro-organismos.

Assunto: Demonstração da presença e da distribuição dos micro-organismos em vários ambientes.

Objetivo: Verificar a presença e a distribuição dos micro-organismos em vários ambientes. Analisar as colônias de micro-organismos de acordo com suas características morfológicas macroscópicas.

Introdução:

Os micro-organismos são encontrados praticamente em todos os lugares. A grande maioria faz parte do ecossistema, onde exerce profunda influência na manutenção do equilíbrio entre os organismos vivos e os compostos químicos do ambiente – sendo denominados de autóctones ou nativos. No solo, nas águas, sobre ou no interior do organismo animal (pele, boca, estômago, intestino), na superfície externa dos vegetais, e, em certos casos no interior de seus tecidos, estão os micro-organismos presentes, permanente ou transitoriamente.

São encontrados também na atmosfera, embora sem qualquer atividade, pois para que possam se manter em atividade, é necessário que estejam em contato com o substrato de onde retiram os nutrientes de que necessitam. No entanto, a demonstração da existência de micro-organismos na atmosfera é de grande importância e aplicação em diferentes campos da microbiologia (microbiologia médica, industrial, agrícola, básica, ambiental, etc.). Quanto mais movimentado e populoso é o ambiente, mais rico em micro-organismos, que podem ser disseminados pela movimentação do ar e pelas correntes aéreas, ele será. Apenas uma minoria dos micro-organismos é patogênica, a grande maioria é benéfica para os seres humanos, outros animais e plantas.

Material:

- ágar PCA (PCA) em placa;

- ágar Sabouraud (SB) em placa.

Metodologia:

- Escolher o local para a pesquisa da presença dos micro-organismos em vários ambientes (fungos e bactérias);

- Identificar as placas (nome dos alunos, data e local escolhido);

- Inocular as placas;

- Incubar a placa PCA a 37 ºC e a placa SB à temperatura ambiente.

Leitura e interpretação:

Uma célula vegetativa ou um esporo de um micro-organismo, em condições nutritivas favoráveis, multiplicando-se sucessivamente, formará uma população visível macroscopicamente, denominada colônia. As características morfológicas macroscópicas das colônias são importantes para a identificação do micro-organismo. Destas características as mais evidentes são:

- Tamanho

colônias pequenas (até 5 mm) ⇒ bactérias e fungos leveduriformes

colônias grandes ⇒ fungos filamentosos

- Aspecto

mucóide, cremoso ou butiroso ⇒ bactérias e fungos leveduriformes

cotonoso, aveludado, granular ou pulverulento ⇒ fungos filamentosos

- Pigmentação

cor do verso ⇒ parte em contato com o ar

cor do reverso ⇒ parte em contato com o meio de cultura (só p/ os fungos filamentosos)

(n° 4 a 6 somente para colônias de bactérias ou de fungos leveduriformes)

- Elevação

plana, elevada, convexa,

monticular, umbiliforme, umbilicada

- Margens

inteira, ondulada, lobada

crenada, filamentosa, ondeada

- Forma

puntiforme, circular, filamentosa

irregular, rizóide, fusiforme

Resultados:

- Anotar os resultados obtidos na tabela abaixo:

Placas

Número de colônias

aspecto filamentoso

aspecto mucóide

total

1 – PCA

2 – SB

Comentários:

A microbiota do ar é transitória e variável, sendo o ar portador de matéria particulada, pó e gotículas, que podem estar carregadas com micro-organismos. O número e o tipo de micro-organismos contaminantes são determinados pelas fontes de contaminação existentes no ambiente.

Os micro-organismos veiculados pelo ar constituem na atualidade, um grande risco em termos de contaminação (colonização e infecção) da pele e superfícies