TRABALHO DE ADMINISTRAÇÃO DE EMPRESAS.

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Estudos fitoquímicos anteriores relataram a ocorrência na casca do tronco de Magnolia ovata de neolignanas, sesquiterpenos e alcalóides ( Stefanello e Alvarenga, 1997 e Stefanello et al., 2002 ). Existe variação considerável na composição química desta parte da planta, com algumas populações acumulando lactonas de sesquiterpeno e outros neolignanas ( Stefanello et al. de 2005 ). As folhas contêm esteróis, saponinas, taninos e alcalóides ( Morato et al., 1989 ). O uso popular contra o diabetes não foi corroborada por estudos farmacológicos, que falharam em demonstrar qualquer efeito hipoglicemiante de extratos de folhas em ratos normoglycaemic, hiperglicemia, ou alloxan diabéticos. No entanto, os óleos essenciais e extratos mostram atividade antibacteriana ( Apel et al., 2006 e Stefanello et al., 2008 ) e do extrato bruto de madeira do tronco apresentaram atividade inseticida ( Coelho et al., 2006 ).

Embora Magnolia ovata é popularmente descrita como um antipirético, uma atividade compartilhada por drogas anti-inflamatórias, o potencial in vivo antipirético e atividade anti-inflamatória de extratos integrais e compostos individuais isoladas de Magnolia ovata casca do tronco não foram investigados. No presente estudo, examinou-se o extracto, fracção de diclorometano e isolado composto de actividade antipirética no modelo de febre induzida por LPS, e também para uma actividade anti-inflamatória no modelo de edema de pata e migração celular induzida por Cg em ratinhos.

2. Materiais e Métodos

2.1. Animais

Os experimentos foram realizados utilizando camundongos machos suíços (25-35 g), alojados em um 12 horas ciclo claro-escuro, com umidade controlada (60-80%) e temperatura (22 ± 1 ° C). A comida ea água estavam disponíveis gratuitamente para os ratos. Os animais foram aclimatados ao ambiente de experimentação por pelo menos 2 h antes do ensaio e foram utilizados apenas uma vez durante todo o experimento. Os estudos apresentados neste manuscrito foram realizadas de acordo com as diretrizes atuais para o cuidado de animais de laboratório e seguindo as diretrizes estabelecidas pelo Instituto Nacional de Saúde dos Estados Unidos, e foram aprovados pelo comitê de ética em pesquisa sobre o uso de animais de laboratório da instituição (Nbr. 39372 / 07-32). O número de animais foi o mínimo necessário para mostrar efeitos consistentes dos tratamentos medicamentosos.

2.2. O material vegetal e preparação da fração extrato e diclorometano

Casca do tronco de ovata Magnólia amostras foi colhida, em outubro de 2003, de uma população que cresce selvagem na cidade de Santos Dumont, Minas Gerais, Brasil (21 ° 28'03 "S, 43 ° 39'26" W), a uma altitude de 1,000 m. Um espécime de vouchers (R. Mello-Silva, 2168) foi depositada no Herbário da Universidade de São Paulo (SPF).

Secou-se e casca do tronco em pó (424 g) foi extraída à temperatura ambiente sucessivamente com hexano e etanol. Os solventes foram removidos sob pressão reduzida, para se obter os extractos brutos em hexano (1,5 g) e etanol (extracto etanólico de Magnolia ovata , EEMO, 22,5 g). Uma parte do EEMO (10,0 g) foi dissolvido em etanol-água (1: 1) e repartiu-se com diclorometano. A camada de diclorometano foi separada e o solvente evaporado para dar 1,54 g de resíduo (fracção DCM).

2.3. A análise fitoquímica

Parte da fracção de DCM (0,22 g) foi submetido a cromatografia em coluna de sílica gel (CC), eluída com AcOEt-petrol (7: 3). As fracções foram analisadas por cromatografia em camada fina (TLC) usando placas de sílica gel desenvolvidas em vários sistemas de solventes. Os compostos foram visualizados por exposição à luz UV 254/366 de luz, pulverização com reagente de Dragendorff e pulverização com 5% (v / v) de H 2 SO 4 , em solução de etanol, seguido por aquecimento numa placa quente. Após esta análise das fracções foram combinadas por similaridade, obtendo-se 9 grupos. Grupo V (15 mg) foi purificado por TLC preparativa de sílica gel eluída com hexano-AcOEt (8: 2) para dar um (2,3 mg) ( Fig 1. UM). O espectro de RMN para este composto foi gravado num espectrómetro Brucker (CA-200), utilizando CDCl 3 como solvente e tetrametilsilano como referência interna.

Figo. 1.

As estruturas químicas de costunolide (A) e partenólido (B) isoladas de Magnolia ovata .

Opções Forma

2.4. Materiais e reagentes

Carragena, lipopolissacarídeo ( E. coli 0111: B4), indometacina foram adquiridos da Sigma Chemical Co. (St. Louis, EUA) e dexametasona (Decadronal ® ), a partir de Prodome Laboratories (Campinas, Brasil). Gel de sílica (Merck, malha 230-400) foi usado para a coluna de separação cromatográfica, enquanto gel de sílica 60 PF 254 (Merck) foi usado para a análise (0,25 mm) e preparativa (1,0 mm) de TLC. Outras drogas e os reagentes usados ​​foram de grau analítico.

2.5. Febre induzida por LPS

Temperatura corporal abdominal foi medida utilizando coletores de dados (data logger Subcue, Calgary, Canadá). Estes foram implantados por via intraperitoneal sob a cetamina-xilazina (60-7,5 mg / kg) e a anestesia condições assépticas uma semana antes da experiência. Os animais foram tratados com cloridrato de oxitetraciclina (400 mg / kg, im) depois da cirurgia. A temperatura do corpo foi continuamente monitorizada e registada em 15 min a partir de intervalos de 2 h antes até 6 horas depois de uma injecção ip de LPS (100 ug / kg), que foi suspenso em 0,9% de solução salina livre de pirogénio. Os controlos foram tratados com o mesmo volume de apirógena 0,9% de solução salina (veículo). EEMO (30 mg / kg), fracção de DCM (4,5 mg / kg), costunolide (0,15 mg / kg), veículo (Tween 80 a 0,1% em água) ou de indometacina (5 mg / kg, controlo positivo), foram administrados por via oral 1 h antes da injeção de LPS. Para o índice de febre, a temperatura corporal abdominal de linha de base (4 medições anteriores o tratamento com extractos, fracções ou compostos) foi determinada para cada animal individual e o valor da linha de base foi subtraída a partir dos pontos de dados individuais de 1 a 6 h após a injecção de LPS aos exclui variações secundárias à manipulação para injeção. Isto permite o cálculo da área sob a curva. Durante a experiência, a temperatura ambiente foi mantida a 30 ° C (zona termoneutra para ratinhos) ( Rudaya et al. de 2005 ). As doses escolhidas