Efeito do pH na atividade da enzima

...

[pic 3]

A tabela a seguir apresenta os dados dos experimentos feito no pHmetro e as leituras das absorbância no espectrofotômetro em 730nm.

Tabela 1. Dados de Absorbância.

Reagentes (0,05 M)

pH

Abs (1º)

Abs (2º)

Branco

-

Branco

Branco

Tampão citrato

2.51

0,015

0,010

Tampão acetato

3,59

0,116

0,120

Tampão acetato

4,46

0,146

0,149

Tampão fosfato

5,7

0,085

0,080

Tampão fosfato

7,01

0,089

0,086

Tampão fosfato

8,23

0,028

0,026

O gráfico a seguir são os dados do pH x absorbância.

[pic 4]

Figura 1. pH versus Absorbância.

No experimento foi utilizada a enzima invertase que era antiga, devido a este fator podemos observar que interferiu nos resultados ocasionando uma diminuição no pH ótimo.

A mudança brusca do pH pode ser um fator na modificação da sua estrutura da enzima devido a uma repulsão de cargas.

Mudanças mais brandas de pH podem levar apenas uma dissociação de enzimas. E também na mudança do pH não afeta apenas a estrutura mas sim a diminuição da atividade.

O pH ótimo foi determinado a partir de uma curva onde o mesmo chegou à um ponto que se encontra à 4 ou seja, apresentou uma maior atividade.

De acordo com Worthington, o pH da enzima invertase é de 4,5. Portanto, está dentro do intervalo que é de 4 - 4,5.

[pic 5]

Com o procedimento realizado conclui-se que o conhecimento para a preparação de soluções tampões é muito importante, pois esta solução pode ser utilizada por uma extensa de reações, visto que há muitas reações que são favorecidas em certos valores de pH. Conclui-se também que a catalise enzimática não é como muitas reações químicas, em que quando aumenta-se a temperatura, a reação ocorre mais rápido, para a catalise enzimática esse fato ocorre até certo ponto, pois se a temperatura estiver muito alta acontece a desnaturação da proteína constituinte da enzima. E, assim como uma temperatura ótima, a atividade enzimática também possui um pH ótimo de na faixa 4,5, sendo que no experimento foi obtido um pH próximo de 4. Ou seja, coerente comparada à literatura.

[pic 6]

AMARAL, C.; Gonçalves, S.(2003). A Vida ao Microscópio Bloco I - Técnicas Laboratoriais de Biologia. Porto Editora. Porto.

CALLl, H.P., Mϋcke, I. (1997), History, Overview and applications of mediated lignolytic systems, especially laccase-mediator-systems (Lignozym® -process), Journal of Biotechnology 53, 163-202.

CAMPOS, Luís S.; Entender a Bioquímica (5.ªEd.), 2009,Escolar Editora, Lisboa

MATIAS, O.;Martins, P.(2006). Manual de biologia de 12º ano. Areal Editores.Porto

LENHINGER, A.L., (1972), Biochemistry, Worth Publishers, Inc., Nova York, 55-56 pp. In

WORTHINGTON, Acesso