Teste do Efeito da Toxicidade de Diferentes Concentrações

...

(µ moles.I-1.min-1)[pic 1]

Para a determinação da atividade especifica (AE) foi utilizada a seguinte equação:

(µ moles.mg.proteínas-1.min-1.)[pic 2]

3.3 Catalase

Para a determinação do tampão, utilizou-se para cada 50mL, Tris HCl 6,055g e EDTA 5mM 0,093g em pH igual a 8,00.

Para a determinação do meio de reação colocou-se 100 µL de H2O2 30% em 100mL de água ultra pura, desta solução usou-se 90 mL, onde em seguida foi adicionado 5mL do tampão da catalase com 4 mL de água ultra pura nesta solução. Para assim realizar a leitura no espectrofotômetro, adicionando 990 µL de meio de reação mais 10 µL da amostra na cubeta de quartzo.

Para a determinação da atividade da catalase foi utilizada a seguinte equação:

[pic 3]

Unidade da CATALASE- µmol H2O2 metabolizado. Min-1.mg de proteína-1.

- Glutationa-S-Transferase (GST)

Para a determinação do tampão de reação foi determinado o tampão fosfato de K+ de 0.1M com pH igual a 7,0. Para 500mL utilizou-se 400 mL de agua Ultra Pura, 3,4g de Fosfato de Potássio Monobasico e 4,35g de Fosfato de Potássio Dibasico.

Para a determinação do CDNB 100 mM em Álcool 100%, utilizou-se 0,020g CDNB para 1000µL de Álcool 100%. Na determinação da GSH (Glutationa Reduzida) 100 mM em tampão fosfato de potássio 0,1M foi utilizado 0,030g para 1000µL de tampão fosfato de potássio.

Posteriormente realizou-se a leitura no espectrofotômetro acrescentando na cubeta 970 µL de Tampão Fosfato de Potássio, 10 µL de CDNB, 10 µL de GSH e 10 µL da amostra.

Para determinação da GST utilizou-se a equação a seguir:

[pic 4]

Expressa em nmol CDNB conjugado.min-1.mg de proteina -1.

- Resultados e Discussão

- Conclusão

Referências

GIUPPONI, C. and SGOBBI, A. Decision Support Systems for Water Resources Management in Developing Countries: Learning from Experiences in Africa.

GOMES, L.C; GOLOMBIESKI, J.I.; GOMES, A.R.C.; BALDISSEROTTO, B. Biologia do Rhamdia quelen. Ciência Rural, 2000.

GHELFI, Ariane. 2014. Efeitos toxicológicos do diclofenaco em peixes Rhamdia quelen.

SILVA, Vera Maria. 2006. Crescimento, Parâmetros Metabólicos e Enzimáticos em Jundiás (Rhamdia quelen) Expostos ao Cobre.