PROJETO UNIFICADO
Por: SonSolimar • 5/11/2018 • 1.291 Palavras (6 Páginas) • 310 Visualizações
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4.0 - ANÁLISE DA ÁGUA DO ESTABELECIMENTO
A análise da água tem como objetivo a detecção de coliformes (totais e fecais) em amostras de água, com aplicação na avaliação da qualidade bacteriológica de águas destinadas a consumo humano.
4.1 - MATERIAL E MÉTODOS
O processo será realizado em algumas etapas sendo elas a presuntiva (caldo LST – Caldo Lauril Sulfato Triptose), confirmação de coliformes totais (caldo VB – Caldo Verde Brilhante) e confirmação de coliformes fecais (caldo EC – Caldo Escherichia Coli):
4.1.2 Material utilizado no processo presuntivo
- Caldo LST
- Pipeta graduada de 10mL.
- Pipetador.
- Tubos de ensaio.
- Tubo de Durhan.
- Amostra de água contaminada.
- Erlenmeyer.
- Bico de Bünsen.
- Estufa.
- Autoclave.
- Balança.
- Tripé.
- Tela de Amianto.
4.1.3 - Métodos do processo presuntivo:
Este primeiro processo é realizado para detectar a presença de coliformes em amostra de água. Faz-se o preparo de 1000 mL de Caldo LST (10 turmas x 10 tubos x 10 mL) dentro do Erlenmeyer, fervendo o caldo em bico de bünsen.
Em dez tubos de ensaio coloca-se 10 mL do caldo LST e o tubo de Durhan, é retirado todo o ar contido dentro do tubo de Durhan. Levam-se os tubos de ensaio para autoclave durante 15 minutos, para eliminação de microorganismos. Após a autoclavagem, pipeta-se 10 mL de água contaminada dentro destes tubos de ensaio (próximos da chama do bico de bünsen) e os mesmos são levados para a estufa a 37°C por 48 horas. O número de tubos positivos relatados foi de 100% (nos 10 tubos).
Todos os tubos apresentam a presença de coliformes. A presença dos coliformes são mostradas pela turvação do caldo e a produção de gás no interior do tubo de Durhan.
4.2 - Material utilizado no processo para confirmação de Coliformes Totais:
- Tubos de ensaio.
- Pipeta graduada de 10 mL.
- Pipetador.
- Tubos de Durhan.
- Caldo VB.
- Tubos positivos com caldo LST.
- Bico de Bünsen.
- Erlenmeyer.
- Alça de Platina.
- Estufa.
- Autoclave.
- Balança.
- Tripé.
- Tela de Amianto
4.2.1 - Métodos do processo para confirmação de Coliformes Totais:
Caldo VB contém sais biliares e corante verde brilhante, que impede a proliferação da flora Gram positiva. Preparou-se 1000 mL do caldo VB (10 grupos x 10 tubos x 10 mL) dentro do Erlenmeyer, fervendo o caldo em bico de bünsen.
Em dez tubos de ensaio coloca-se 10 mL do caldo VB e o tubo de Durhan, onde é retirado todo o ar contido dentro do tubo de Durhan. Levam-se os tubos de ensaio para autoclave durante 15 minutos a 121°C, para eliminação de microorganismos. Após a autoclavagem, se pega uma alçada do conteúdo dos tubos positivos da amostra anterior (caldo LST) e coloca-se esta alçada dentro destes tubos de ensaio contendo caldo VB (sempre próximos da chama do bico de bünsen) e os mesmos são levados para a estufa a 37°C por 48 horas.
Pode-se observar a confirmação da presença de coliformes totais nas amostras, sendo observada.
4.2.3 - Material utilizado no processo para confirmação de Coliformes Fecais:
- Tubos de ensaio.
- Pipeta graduada de 10 mL.
- Pipetador.
- Tubos de Durhan.
- Caldo VB.
- Tubos positivos com caldo VB.
- Bico de Bünsen.
- Erlenmeyer.
- Alça de Platina.
- Inóculo contendo E. coli e E. aerogenes
- Banho-Maria
- Autoclave.
- Balança.
- Tripé.
- Tela de Amianto
4.2.4 - Métodos do processo para confirmação de Coliformes Fecais:
Caldo EC contém 15% de sais biliares impedindo a proliferação da flora Gram positiva. Preparou-se 1000 mL do caldo EC (10 grupos x 10 tubos x 10 mL) dentro do Erlenmeyer, fervendo o caldo em bico de bünsen.
Em dez tubos de ensaio coloca-se 10 mL do caldo EC e o tubo de Durhan, onde é retirado todo o ar contido dentro do tubo de Durhan. Levam-se os tubos de ensaio para autoclave durante 15 minutos a 121°C, para eliminação de microorganismos. Após a autoclavagem, se pega uma alçada do conteúdo dos tubos positivos da amostra anterior (caldo VB) e coloca-se esta alçada dentro destes tubos de ensaio contendo caldo EC (sempre próximos da chama do bico de bünsen) e os mesmos são levados para banho-maria a 44,5°C por 24 horas. Leva-se para a estufa também um tubo contendo E. coli e outro contendo E. aerogenes, que são utilizados para o controle da temperatura do banho-maria,sabendo-se que o tubo contendo
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