DETERMINAÇÃO DO ESPECTRO DE ABSORÇÃO DE CORANTES E CONSTRUÇÃO DE CURVA PADRÃO

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De acordo com o gráfico 1 verificamos que o azul de bromofenol (ABF) absorve a luz visível com mais intensidade no comprimento de onda de 580nm. Na solução de metilorange (MO) é possível identificar que o ponto de maior absorção foi no comprimento de onda de 460nm. Ambas as soluções apresentaram seus pontos máximos de absorbância de luz, ou seja, menor transmitância, no comprimento de onda indicado na literatura.

Como a interação da luz com a matéria depende da estrutura química dos compostos, o espectro de absorção é uma forma de caracterização que permite verificar qual a faixa de comprimento de onda em que um dado composto apresenta sua maior afinidade de absorção. Embora dois ou mais compostos possam absorver luz dentro da mesma faixa de comprimento de onda, isso não invalida a especificidade do método, pois, normalmente, esta não reside no espectro de absorção (BENTO, 2010). Contudo, a sensibilidade do método depende da escolha do melhor comprimento de onda eletromagnética para leituras espectrofotométricas, pois só assim poderemos detectar o composto em baixas concentrações.

Os comprimentos de onda para as soluções diluídas e não diluídas foram as mesmas, porém, nas soluções diluídas a absorbância foi menor isso pode ser explicado de acordo com a Lei de Lambert-Beer que diz que a absorbância é proporcional à concentração da espécie química absorvente, sendo constante o comprimento de onda, a espessura atravessada pelo feixe luminoso e demais fatores (UFRJ, 2010).

Ainda de acordo com o gráfico foi possível observar na solução que continha a mistura dos dois corantes (ABF e MO), utilizando a água como branco, os comprimentos de onda com maiores pontos de absorção ocorreram no comprimento de 460 e 580nm, mesmos valores encontrados para os corantes quando analisados separadamente. Quando o branco utilizado foi o MO o comprimento de onda de maior absorção foi em 580nm, ponto máximo de absorção do ABF e o inverso ocorreu quando o branco utilizado foi o ABF.

A luz pode ser entendida como uma forma de energia, de natureza ondulatória, caracterizada pelos diversos comprimentos de onda e que apresenta a propriedade de interagir com a matéria, sendo que parte de sua energia é absorvida por elétrons da eletrosfera dos átomos constituintes das moléculas (MOURA et. al., 2015).

Construção da curva padrão

A curva padrão corresponde à relação gráfica entre os valores de absorbância e concentração. De acordo com as soluções abaixo foi feita a curva padrão do MO, verificando no espectrofotômetro a absorbância das soluções no comprimento de onda de 460nm, cujas concentrações são conhecidas (através da formula C1 V1 = C2 V2).

Tabela 3: Tabela para a construção da curva padrão.

MO (mL)

H2O (mL)

Absorbância

Concentração

0

5

0

0

1

4

0,139

0,002

2

3

0,264

0,004

3

2

0,389

0,006

4

1

0,515

0,008

5

0

0,651

0,01

Com os dados obtidos foi construído o seguinte gráfico:

[pic 5]

Gráfico 2: Curva padrão da solução de metilorange (MO).

Com os valores de absorbância e de concentração conhecidos, pode-se traçar um gráfico cujo perfil é conhecido como curva-padrão ou curva analítica. Nesse gráfico, a reta indica a proporcionalidade entre o aumento da concentração e da absorbância e a porção linear corresponde ao limite de sensibilidade do método espectrofotométrico para o soluto em questão (UFRJ, 2010).

A curva padrão serve como referência para determinar a concentração de um soluto em uma amostra por espectrofotometria, temos a comparação da absorbância da amostra com uma solução padrão. Em geral, é utilizada uma solução padrão com diferentes concentrações, que tem sua absorbância determinada. Esses padrões são preparados diluindo-se a solução padrão na proporção necessária para a obtenção das concentrações desejadas.

- CONCLUSÃO

A presente prática experimental permite concluir cada substância possui um comprimento de onda onde terá a absorção máxima da luz e consequentemente a transmitância mínima. Também pode-se concluir que a curva padrão da substância é uma ferramenta muito útil, uma vez que a partir dela pode-se determinar a absorbância quanto a concentração da solução.

- REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

BENTO, J. A. C.; DETERMINAÇÃO DO ESPECTRO DE ABSORÇÃO DE CORANTES E CONSTRUÇÃO DA CURVA PADRÃO. Universidade Federal de Goiás – ICB, 2010.

MOURA, D. S.; CARRER, H.; GALLO, L. A.; BASSO, L. C.; Bioquímica – LCB 208: Roteiro de aulas práticas. Universidade de São Paulo. Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz, Piracicaba, 2015.

PEREIRA, M. D. Química VI – UFRJ. Consórcio CEDERJ, vol. 1, 2º edição, Rio de Janeiro, 2013, 187p.

UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO DE JANEIRO. Espectrofotometria. Instituto de Química. Rio de Janeiro, 2010.