Relatório de Análise de Água

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3.1 - Teste presuntivo

3.1.1 – Materiais

- Amostra de água;

- 9 ml de água destilada (Tubos de Durhan);

- Caldo de Bile verde Lactosado;

- Tubo de ensaio com caldo glicosado;

- Tubo de Durhan;

- Amostra de água;

- Alça de Trigace;

- Pipeta;

- Bico de Bunsen;

- Placa petri;

- Placa de triptoma;

- Ponteira;

- Alça de Drigalsky

- Caldo glicosado;

3.1.2 – Métodos

Para o método presuntivo foi tomada uma amostra de água DESCONHECIDA, com a Pipeta esterilizada foi coletada 1ml de amostra de agua, iniciando-se a diluição nos tubos de Durhan que continham 9 ml de água destilada, tomando-se o cuidado de fazer sua esterilização por flambagem com o bico de Bunsen ( FIGURA 1 ).

[pic 4]

Com a adição de 1ml da amostra de água no primeiro tubo obteve-se a primeira amostra de com a diluição de 1/10 (FIGURA 2). A partir desta amostra de 1/10 foi se retirado uma 1ml da diluição com a pipeta esterilizada e inserida em outro tubo de Durhan com 9 ml de água destilada, formando-se uma diluição de 1/100, desta amostra de 1/100 foi retirada 1 ml da diluição e inserida em outro tubo de Durhan, formando uma nova diluição de 1/1000.

[pic 5]

Das amostras já diluídas, 1/100 e 1/1000, foram retirados 1 ml de cada e transferidos para as placas de Petri e de Triptoma respectivamente.....

O objetivo deste processo era formar diluições de concentrações diferentes, com essa amostras foi retirado 1ml da amostra de água das diluições de 1/100 e 1/1000 e colocados nas placas Petri e placa de Triptoma, espalhando-se a amostra com a Alça de Drigalsky ( FIGURA 3 e 4 ) para observar se a haveria a formação de colônias.

[pic 6] [pic 7]

Após a formação das diluições de 1/10, 1/100 e 1/1000 nos tubos de Durhan, e o espalhamento nas placas Petri, estas foram levados para a estufa a temperatura com temperatura de 37°, ao tempo de 24 a 48 horas.

3.2 - Teste confirmativo

3.2.1 – Materiais

- 1 Tubo de caldo

- 1 Tubo de Caldo bili verde Brilhante(C.B.V.B);

- Amostra com caldo glicosado do teste presuntivo;

- Caldo de Bile verde Lacto sado;

- Alça de platina;

- Estufa para banho maria;

- Estufa

3.2.2 – Métodos

Com a execução do teste presuntivo e após o tempo de 48 horas, verificou-se que as amostras, observando –se que houve formação de colônias nas placa Petri ( FIGURA X) e houve a turvação e formação de gás das amostras dos tubos de Durhan ( FIGURA X)

[pic 8]

[pic 9]

Como o resultado do teste presuntivo foi positivo, isso indica que a presença de coliformes totais na amostra recolhida, fazendo-se necessário a realização do teste confirmativo para identificar se a presença de Escherichia coli. O teste confirmativo foi feito a partir das amostras de 1/100 e 1/1000, usando –se as a alça de platina flambada , retirou –se uma amostra das da diluição 1/000 (FIGURA ), e inseriu-se nos tubos com caldo lactosado e o caldo bili verde brilhante. Após inseridas as amostras de caldo lactosado foi levada a estufa de banho maria a temperatura de 42° por 24 a 48 horas e o caldo bili verde brilhante levado a estufa a temperatura de 37° por 24 a 48 horas

[pic 10]

Teste confirmativo a) tomar o número de tubos do Teste Presuntivo que deram Positivos (Formação de gás) nas 3 diluições 1: 1; 1:10 e 1:100; 0 Fundação Nacional de Saúde b) tomar igual número de tubos contendo o meio de Cultura Verde Brilhante Bile a 2%; c) com a alça de platina, previamente flambada e fria, retirar de cada tubo positivo uma porção de amostra e inocular no tubo correspondente contendo o meio Verde Brilhante. Este procedimento chama-se repicagem; d) identificar os tubos; e) incubar durante 24/48 horas a 35 ± 0,5ºC; f) se no final do período de 24/48 horas houver a formação de gás dentro do tubo de Durhan o teste é considerado Positivo. Caso não haj

4 – RESULTADOS E CONCLUSÕES

REFERÊNCIAS

http://bvsms.saude.gov.br/bvs/publicacoes/manual_analise_agua_2ed.pdf

http://www.uff.br/bacteriologia/aulaspraticas/colimetria.htm

NBR -10719/1989 - Apresentação de relatório técnico científicos

ratório de Geotecnia - UFBA