Relatorio solubilidade das proteinas

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Na precipitação com reagentes ácidos é formado sais insolúveis, foi possível identificar a formação de um precipitado esbranquiçado e viscoso grudado na parede do tubo logo que se adicionou o acido tricloroacético.

Na solubilização por ação da força iônica (Salting in), após a inserção de solução de cloreto de sódio favoreceu a solubilidade, e também a interação proteína-solvente.

Na precipitação e ressolubilização por ação da força iônica (Salting out), após a inserção da água destilada,foi evidenciado que a água interage com as proteínas, e após a inserção de sulfato de amônio, foi nítido que o sal competiu com a proteína (Ovoalbumina) pelo solvente, e ocorreu a precipitação

Discussão de resultados:

Precipitação pelo calor:

O banho maria desempenhou o papel da fonte de calor. O tubo contendo a ovoalbumina (clara de ovo), após o aquecimento sofreu desnaturação da sua estrutura terciaria. Já a caseína não obteve evidencias (precipitação) de desnaturação, pois a mesma apresenta um número razoavelmente alto de peptídeos de prolina que não interagem. Não apresentam nenhuma ponte dissulfeto como consequência apresenta relativamente pouca estrutura secundária ou estrutura terciaria, não formando estruturas globulares. Por isso não pode desnaturar.

Precipitação por reagente ácido:

Foi adicionado gota-a-gota o ácido tricloroacético(TCA) e assim observou-se que a ovoalbumina precipitou, pois ao atingir o ponto isoelétrico houve o aumento da interação proteína-proteína, formando sais insolúveis ao solvente.

Solubilização por ação da força iônica:

Foi adicionado baixas concentrações NaCl(cloreto de sódio) á ovoalbumina aumentando a solubilidade da proteína. Desta forma, o Na+ e o Cl- , em razão da sua força iônica, ligam-se aos polos negativos e positivos da proteína, ficando solvatados.

Precipitação e ressolubilizaçao por ação da força iônica:

Foi adicionado altas concentrações de (NH4)2SO4(Sulfato de amônio) á solução da prática anterior. Observou-se que a proteína precipitou, evidenciando o aumento da interação proteína-proteína pela ação do sal que compete como a proteína pelo solvente.

Conclusão:

Após a conclusão da prática contatou-se que a temperatura, assim como o pH e a força iônica influenciam na solubilidade das proteínas. A temperatura desnatura as estruturas quaternárias, terciárias e secundárias da proteína ocorrendo a precipitação. Em relação ao pH , quando este é igual a PI a carga liquida da proteína é zero aumentando a interação proteína-proteína onde ocorre a precipitação. A força iônica contribui tanto pra precipitação (salting-out) quanto pra solubilização (salting-in), dependendo da concentração de íons, sendo que o Ph e a força iônica não alteram a integridade estrutural da proteína.

Referências:

COSTA, A. I., Solubilidade das proteínas; Disponível em: Acesso em: 08/11/2016;

NEVES, V. A., Experimentos de bioquímica; Diisponível em: Acesso em: 08/11/2016;

Apostila: Caderno didático: Práticas de bioquímica de José Humberto de Queiróz.