CARACTERIZAÇÃO FITOQUÍMICA DO EXTRATO HIDROALCOÓLICO OBTIDO DE FOLHA DA Persea americana

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2.5. Testes para alcalóides

No teste para alcalóides redissolveu-se alguns miligramas do EB em 8 mL de ácido clorídrico a 5%. Separou-se 4 porções de 2 mL em 4 tubos de ensaios aos quais se adicionou, respectivamente: 5 gotas do Reagente Dragendorff - sol. A+B no tubo 1, no qual o surgimento de coloração vermelho-tijolo indica reação positiva; 5 gotas do Reagente de Mayer no tubo 2, no qual a aparição de precipitado esbranquiçado indica reação positiva; 5 gotas do Reagente de Bertrand no tubo 3, no qual o surgimento de precipitado esbranquiçado indica reação positiva; e 5 gotas do Reagente de Bouchardat no tubo 4, no qual a observação de precipitado vermelho-tijolo indica reação positiva.

2.6. Teste para Aminoácidos e proteínas

No teste para aminoácidos e proteínas utilizou-se a Reação da Ninidrina, na qual redissolveu-se alguns miligramas do EB em 2 mL de água destilada. Em seguida, aplicou-se gotas dessa solução aquosa em papel filtro até formar um halo de 1 cm de diâmetro. Sobre a mancha, juntou-se 2 gotas do reativo de Ninidrina a 1%. O papel filtro foi aquecido na estufa a 100ºC por, aproximadamente, 3 minutos. O surgimento de coloração violeta ou azul persistente indica reação positiva.

2.7. Teste para catequinas (flavanas)

No teste para catequinas (flavanas), foi redissolvido alguns miligramas do EB em 3 mL de metanol num tubo de ensaio. A essa solução juntou-se 1 mL de vanilina a 1% e 1 mL de ácido clorídrico concentrado. O surgimento de uma coloração vermelha intensa indica reação positiva.

2.8. Teste para Taninos

No teste para taninos foram usadas duas reações: a) Reação com cloreto férrico, no qual redissolveu-se alguns miligramas do EB em 5 mL de água destilada. Posteriormente, adicionou-se 4 gotas de solução de cloreto férrico a 1%. O tubo de ensaio foi bem agitado observou-se se ocorreu a variação de cor e/ou formação de precipitado escuro. O teste foi comparado com o tubo branco, que continha apenas água e cloreto férrico. O surgimento de uma coloração variável entre azul e vermelho é indicativo da presença de fenóis; formação de precipitado azul escuro indica a presença de taninos pirogálicos (taninos hidrolisáveis); e a aparição de precipitado verde indica a presença de taninos flobabênicos (taninos condensados ou catequéticos); b) Redissolveu-se alguns miligramas do EB em 4 mL de água destilada e, após filtração, acrescentou-se 5 gotas de solução de gelatina a 0,5%. O surgimento de precipitado indica reação positiva para taninos.

2.9. Teste para Carboidratos redutores

Nesse teste realizou-se duas reações: a) Reação de Fehling, na qual redissolveu-se alguns miligramas do EB em 5 mL de água destilada. Posteriormente, adicionou-se 1 mL do reativo de Fehling “A” e 1 mL do reativo de Fehling ”B” e a solução foi aquecida até a ebulição. A formação de um precipitado vermelho-tijolo indica a presença de açucares redutores. Em caso de reação negativa, é necessário executar o segundo teste: b) Redissolveu-se alguns miligramas do EB em 3 mL de água destilada. Posteriormente, adicionou-se 1 mL de ácido clorídrico concentrado e ferveu-se a solução em banho-maria por 10 minutos. Após o resfriamento, neutralizou-se a solução com hidróxido de sódio 20%. Em seguida, adicionou-se 1 mL do reativo de Fehling “A” e 1mL do reativo Fehling “B”, com posterior aquecimento em banho-maria por 5 minuto. A formação de um precipitado vermelho-tijolo indica reação positiva.

2.10. Reação para polissacarídeos

Na reação para polissacarídeos adicionou-se, em um tubo de ensaio, 2 gotas de solução de Borax a 1% e 2 gotas de solução de fenolftaleína, o que produziu uma solução rosa. A adição de alguns miligramas do EB sobre a solução acima deve ocasionar o desaparecimento da coloração rosa, que reaparece ao se aquecer a solução e some novamente ao resfriamento.

3 RESULTADOS E DISCUSSÕES

Das quatro reações gerais realizadas para alcalóide (Dragendorff, Mayer, Bertrand e Bouchardat), nenhuma apresentou formação de precipitado ou mudança de coloração, o que indica reação negativa para esse metabólito. No teste para aminoácidos e proteínas, após o aquecimento a 100 ºC por 3 minutos, a coloração violeta se manteve persistente, o que indica reação positiva para esses compostos. Não houve mudança de coloração na reação para catequinas, indicando reação negativa. Na reação com cloreto férrico acorreu formação de precipitado escuro de tonalidade azul indicando reação positiva para taninos pirogálicos ou hidrolisáveis, enquanto que na reação com solução de gelatina a 0,5% nada ocorreu. As duas reações realizadas para carboidratos redutores não tiveram formação de precipitado vermelho-tijolo, portanto, os resultados foram negativos. A coloração se manteve constante na reação para polissacarídeos após aquecimento e resfriamento, indicando ausência de polissacarídeo.

A tabela 1 resume os resultados obtidos nas reações:

Tabela 1 – Resultados obtidos na triagem fitoquímica

Teste para

Extrato hidrofílico

1. Alcalóides

1.1 Dragendorff

Ausente

1.2 Mayer

Ausente

1.3 Bertrand

Ausente

1.4 Bouchardat

Ausente

2. Aminoácidos e proteínas

Presente

3. Catequinas (flavanas)

Ausente

4. Taninos

4.1 Taninos pirogálicos ou hidrolisáveis

Presente

4.2 Reação com solução de gelatina 0,5%

Ausente

5. Carboidratos Redutores

5.1 Reação de Fehling