Relatório de Extração de DNA

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O sal, NaCl, foi adicionado para proporcionar um ambiente favorável para extração do DNA, pois depois de dissolvido, sofre dissociação e contribui com íons positivos (Na+), que neutralizam a carga negativa do grupo fosfato do DNA, e com íons negativos (Cl-), que vão neutralizar a carga positiva das proteínas ligadas inicialmente ao DNA. Dessa forma a molécula de DNA não sofre repulsão de cargas entre si, o que favorece sua aglomeração.

Em seguida foi acrescentado o SDS 2%, que é um detergente, e esta substância atuou desestruturando e provocando a ruptura da membrana plasmática e nuclear, já que ambas são compostas principalmente por lipídios, deixando assim o DNA disperso na solução.

Após centrifugar a solução, foi retirado o sobrenadante, e o que ficou foi só o DNA, podendo ainda estar presente algumas proteínas, e nesse tubo foi acrescentado lentamente o álcool gelado pelas bordas, para que ocorra a precipitação do DNA devido a sua baixa solubilidade nesse solvente, e quanto mais gelado estiver, menor será a solubilidade e melhor será o processo de extração. No álcool, o DNA aumenta a sua compactação e tende a formar fibras, se tornando visível.

Essa solução foi novamente centrifugada, para que o DNA fique peletizado, retirado e álcool e ressuspendido em água.

A prática de extração de DNA foi realizada de forma muito didática, o que torna mais fácil o aprendizado e mais claro os conhecimentos já adquiridos, além de auxiliar na prática de manuseamento dos equipamentos.

Referência Bibliográfica

² AIDAR, Marisi et al. Extração do DNA genômico a partir de células epiteliais bucais utilizando acetato de amônio. 2006.

¹ SIMONATO, Luciana Estevam et al. Avaliação de dois métodos de extração de DNA de material parafinado para amplificação em PCR. J Bras Patol Med Lab, v. 43, n. 2, p. 121-7, 2007.