Extração de DNA Total Todo ser vivo possui DNA (Ácido Desoxirribonucléico)

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MATERIAL E MÉTODOS

Pipeta de precisão

Aparelho de eletroforese em gel (iBASE® invitrogen)

Gel de agarose 0,8% Clonewell ( E-GEL® invitrogen)

Marcador de alto peso molecular

Amostras preparadas de :

BST (C) - Carne do Peixe;

BST (V) - Vísceras do Peixe;

BST (G) – Guelra do peixe;

Procedimento

Foi colocado com o auxílio da pipeta 10 microlitros da mistura de DNA nos poços da primeira placa de gel, a amostra (C) nos campos (poços) 7 e 8 da carreira de cima, a amostra (V) nos campos 1 e 2 da carreira de baixo assim como a amostra (G) foi aplicada nos poços 3 e 4 da mesma carreira, e a placa de gel é então colocado no aparelho de eletroforese em gel (iBASE® invitrogen) o equipamento é fechado e o campo elétrico é aplicado no gel, através de um dispositivo diferencial de energia elétrica e as macromoléculas vão sendo distribuídas pela extensão do gel e são separadas em função de sua massa e tamanho molecular que são os principais fatores que determinam a mobilidade eletroforética, depois de ligado por alguns minutos é possível visualizar a fita de DNA.

[pic 1]

Aparelho de eletroforese em gel (iBASE® invitrogen)

. [pic 2] [pic 3]

Placa de Gel de agarose Parte de trás da placa com fitas de cobre

[pic 4] [pic 5]

Primeira Placa Segunda Placa

CONCLUSÃO

A realização da prática de extração de DNA; e eletroforese em gel de agarose foi muito importante para a obtenção de novos conhecimentos. Foi possível identificar todo o material necessário para a realização das técnicas e todos os objetivos propostos como isolar amostras de DNA a partir de amostras de peixe e a análise de fragmentos por meio da eletroforese e conhecer o material necessário para essa técnica, foram alcançados com êxito.

Amostras:

BST (C) - Carne do Peixe;

BST (V) - Vísceras do Peixe;

BST (G) – Guelra do peixe;

No primeiro gel, as amostras (V) e (G) foi possível visualizar a fita de DNA.

No segundo gel, na amostra (c) aplicadas nos campos 5 e 6 de baixo, também foi possível visualizar a fita de DNA.

Concluímos que, os métodos de eletroforese convencionais são baseados na habilidade de um gel separar moléculas, com base no tamanho, sob a influência de um campo elétrico unidirecional. Em contraste, utilizam-se sucessivos campos elétricos alternados que forçam as moléculas a mudarem continuamente a direção de migração, sendo uma técnica bastante exata.

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