Meio de culturas
Por: kamys17 • 30/10/2018 • 1.673 Palavras (7 Páginas) • 447 Visualizações
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Hans Christian Gram em 1884 desenvolveu o método de coloração de bactérias denominado coloração de gram. Esse método nos permite observar bactérias gram-positivas que se colorem com violeta-de-metila e é encontrada em quase todos os ambientes, e também as gram-negativas que colorem com safarina ou fucsina e são geralmente as bactérias patogênicas. (TORTORA, FUNKE, CASE, 2012)
- OBJETIVO
Realizar práticas com o intuito de aprender a preparar meio de cultura caseiro, fazer inoculação de microrganismos, preparar lâminas com coloração gram e analisar a água, visando dominar algumas das principais técnicas utilizadas em laboratório de análises microbiológico.
- MATERIAIS E REAGENTES
- PREPARO DE MEIO DE CULTURA CASEIRO
- Bico de Bunsen
- Tela de amianto e tripé
- Becker
- Bastão de vidro
- Placas de Petri
- Panela de pressão
- Gelatina incolor
- Repolho roxo
- Batata
- Sal
- Açúcar
- INOCULAÇÃO DE MICRORGANISMOS
- Alça de transferência (alça de platina)
- Placa de petri com o meio de cultura
- Locais para a coleta de microrganismos
- COLORAÇÃO DE GRAM
- Béqueres
- Laminas para microscopia
- Bico de Bunsen
- Alça de transferência (alça de platina)
- Microscópio
- Papel filtro
- Óleo de imersão
- Corante violeta-de-metila
- Água
- Lugol
- Álcool etílico 95%
- Corante Fucsina
- ANÁLISE DE ÁGUA
- Petrifilm
- Colilert
- Água coletada de diferentes pontos
- Contador de células
- Hastes flexíveis
- Becker
- PROCEDIMENTOS
- PREPARO DE MEIO DE CULTURA CASEIRO
- Cortar as batatas e o repolho e colocar pra cozinhar na panela de pressão, utilizando o bico de Bunsen.
- Após o cozimento, coar, separando o líquido e colocando em béqueres próximo ao fogo para não haver contaminação.
- Adicionar sal e açúcar, misturar.
- Em seguida foi colocar 125g de gelatina incolor em cada becker aos poucos e mexendo para não empelotar.
- Ainda próximo ao fogo, colocar a mistura dos béqueres nas placas de petri, selar com fita e levar ao refrigerador.
- INOCULAÇÃO DE MICRORGANISMOS
- Ferver hastes flexíveis, com a intenção de esterilizá-las.
- Passar as hastes flexíveis sobre o local de onde se queira fazer a inoculação de microrganismo (exemplo tela do telefone) por umas cinco vezes e esfregar na placa de petri em forma de zig-zag, de leve, sem abrir muito e de preferência perto do fogo para não haver contaminações.
- Fechar e levar a estufa.
- COLORAÇÃO DE GRAM
- Próximo ao fogo, fazer o esfregaço na lâmina, utilizando as colônias que proliferaram da inoculação realizada anteriormente.
- Espere secar.
- Cubra-o pingando gotas de violeta-de-metila e deixe agir por 15 minutos.
- Adicione água ao esfregaço, em cima do vileta-de-metila, cobrindo toda a lâmina. Deixe agir por 45 segundos.
- Escorra o corante e lave o esfregaço em um filete de água corrente.
- Cubra a lâmina com Lugol e deixe agir por 60 segundos.
- Escorra e lave em um filete de água corrente.
- Aplique álcool etílico a 95% para descorar a lâmina por 10 a 20 segundos.
- Lave em filete de água corrente.
- Cubra toda a lâmina com fucsina e deixe corar por aproximadamente 30 segundos.
- Lave em filete de água corrente.
- Deixe a lâmina secar e observe no microscópio.
- Aplique o óleo de imersão na objetiva 100x.
- ANÁLISE DE ÁGUA
*Colilert
- Coletar 100 ml de água de diferentes pontos em um erlenmeyer.
- Colocar 1 Colilert em cada erlenmeyer.
- Levar a estufa por 5 dias.
*Petrifilm
- Fazer a coleta do ponto desejado (água do bebedouro).
- Se o local for seco, passar a haste flexível e depois mergulhar num becker com água e deixar por 15 minutos, após esse tempo despeje a água do no Petrifilm.
- Colocar o Petrifilm na estufa por no mínimo 3 dias.
- RESULTADOS E DISCUSSÃO
- PREPARO DE MEIO DE CULTURA CASEIRO
Para o preparo do meio de cultura a turma trabalhou em equipe e de forma organizada, seguindo as orientações do procedimento. Como resultado obtivemos
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