Ética relativamente às células em meio de cultura

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Células que sofrem replicação constantemente devem ser analisadas quanto às suas características genotípicas (cariotipagem e determinação de isoenzimas) e fenotípicas (determinação do “doubling time” e determinação de marcadores de superfície).

Ao adquirir células de outro laboratório deve-se recorrer aos processos de criopreservação e conservação. No processo de criopreservação as células devem ser congeladas lentamente a uma taxa de 1ºC/min, até chegar a -130ºC com um crioprotetor; algumas podem ter como requisito o congelamento rápido de 5-10ºC/min. No processo de conservação as células devem ser conservadas em nitrogénio líquido ou ultra-freezer de -140ºC. Mas este último processo traz algumas desvantagens, pois ao se manipular nitrogénio líquido pode-se sofrer queimaduras por frio, congelamento e asfixia.

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Meios de cultivo:

Já há mais de 50 anos que o desenvolvimento dos meios de cultivo tem vindo a ser estudado. No início utilizou-se fluidos biológicos, porém Eagle desenvolveu um meio denominado Meio Mínimo Essencial de Eagle (ENEM). Este meio contém 13 aminoácidos, 8 vitaminas, 6 sais iónicos e soro dializado para promover um crescimento com componentes inespecíficos.

Na década de 90 começaram a ser desenvolvidos os chamados meios sérum-free, trazendo assim várias vantagens em relação aos meios com proteínas derivadas de animais, tais como:

- Diminuição do risco de transmissão de micoplasma;

- Diminuição do risco de transmissão de vírus de origem animal;

- Eliminação da transmissão da Encefalopatia espongiforme;

- Diminuição da variação de lote a lote o qual causa inconsistência nas propriedades de crescimento;

- Redução das altas concentrações de proteínas o qual pode dificultar a purificação do produto;

- Redução do alto custo de obtenção do soro fetal bovino;

- Redução das dificuldades de obtenção em função de estar disponível durante a gestação do animal;

- Eliminação da garantia limitada em função do período de estocagem;

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Relativamente a documentação e informação necessária para utilização dos materiais e métodos, a documentação deve ser recuperável e deve conter:

1. O objetivo do trabalho;

2. A base técnica para escolha dos materiais e procedimentos;

3. Origem e característica das células;

4. Protocolos laboratoriais incluindo resultados e conclusão dos insumos, matéria prima e controle de qualidade.

5. Preservação e estocagem das células;

6. Registro de qualquer desvio durante processo e controle.

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Conclusão

Ao fim deste trabalho concluímos que na cultura de células é necessário que haja rigor para que estas se consigam desenvolver. Para que isto seja possível é necessário que se conheçam as necessidades nutritivas dos microrganismos; a composição, preparação, armazenamento e utilização do meios de cultura e as técnicas de sementeira.

É necessário também a manutenção de um alto padrão de qualidade de todo material envolvido, para que haja a correta aplicação de quaisquer resultados produzidos.

Sem o rigor e ética necessários na cultura de células todos os factores poderão influenciar nos resultados obtidos, não obtendo assim os resultados mais corretos.

Bibliografia/ Webgrafia

Baatout (2004). "Cytometricmethods to analyzeradiationeffects." JournalofBiological RegulatorsandHomeostaticAgents18(2): 101-105.

Coimbra, U. (2008). "Noções básicas de cultura de células." Retrieved Maio 2008, from

http://www.academiafarmacia.org.br/marcoantonio.pdf