Meios de cultura

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1. Pesar ou medir as substâncias separadamente;

2. Dissolver cada ingrediente em volume apropriado de água destilada;

3. Aquecer para dissolver (fundir) o ágar. O ágar não é considera uma fonte de nutrientes para os microrganismos;

4. Determinar o pH do meio fluido, ajustando se for necessário. Pode-se aferir o pH por indicadores ou potenciômetros. Valores baixos de pH suprimem bactérias e favorecem fungos. Para baixar o pH adiciona HCl e para aumentar NaOH;

5. Distribuir em recipientes adequados (tubos, Erlenmeyers, garrafas), fechar o recipiente com algodão envolvido em gaze, etc. e proteger com papel madeira ou alumínio;

6. Codificar o recipiente, identificando-o com a sigla do nome do meio e data;

7. Esterilizar o meio em autoclave a temperatura e tempo indicado para cada tipo de meio.

4- MANEJO DE RECIPIENTES

- Tubo de ensaio: após sair da autoclave colocar o tubo contendo o meio sólido inclinado, sobre um suporte, à temperatura ambiente (meio inclinado) ou colocar para esfriar na posição vertical (meio em camada ou coluna alta).

- Erlenmeyer, Balão de fundo chato, etc.: no caso de meio sólido, pode fazer a distribuição do meio nas placas de Petri logo após o resfriamento parcial dos recipientes saídos da autoclave ou na ocasião oportuna. Neste caso, fundir o meio, resfriá-lo até 40-45 ºC (evitar a formação de água condensada na tampa da placa de Petri) e verter na placa previamente esterilizada.

Meios líquidos ou semi-sólidos não necessitam de manejos especiais, devendo ser mantidos em posição vertical. O meio de cultura pode ser guardado a temperatura ambiente ou em refrigeração até o uso.

5- CÁLCULO PARA PREPARO DE MEIO DE CULTURA – REGRA DE TRÊS SIMPLES E DIRETA

Ex.: Um determinado meio de cultura traz na instrução que se deve utilizar 25g para 1(um) litro de água. Para preparar 100ml deste meio, utiliza-se:

25g 1000 mL de água

x 100 mL

x = 2,5