Relatório: Dosagem de glicose em plasma sintético

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Os tubos foram homogenizados e levados em banho-maria a 37°C por 10 minutos.

Posteriormente as amostras foram levadas para análise em espectrofotômetro calibrado com comprimento de onda de 505 nm.

No espectrofotômetro, primeiramente acertou-se o zero do aparelho com o branco (tubo A). Após calibrar a máquina, analisou-se o tubo B e o tubo C no espectrofotômetro.

Para cálculo dos resultados foi utilizada a fórmula abaixo:

Glicose (mg/dL) = [pic 1]x 100

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- RESULTADOS E DISCUSSÃO

Após misturar a glicose com o reagente e a amostra com o reagente, os tubos apresentaram uma coloração avermelhada, pois de acordo como demostrado na figura 2, a glicose oxidase catalisa a oxidação da glicose. O peróxido de hidrogênio formado reage com 4-aminoantipirina e fenol, sob a ação catalisadora da peroxidase, por meio de uma reação oxidativa de acoplamento formando uma antipirilquinonimina vermelha (Bergmeyer, 2012).

Figura 2: Reação de oxidação da glicose[pic 2][pic 3]

Após calibrar o espectrofotômetro com a cubeta contendo apenas reagente, para que não houvesse interferência da cor já presente no reagente, foi feita a leitura da absorbância das cubetas de padrão e amostra (plasma). A absorbância e transmitância são os princípios de funcionamento da espectrofotometria, em que diferentes substâncias têm diferentes padrões de absorção (Skoog et al 2006).Os resultados das absorbâncias obtidas estão demostradas no quadro 3.

Absorbância (nm)

Branco

Usado para calibrar o aparelho

Padrão

0,627 nm

Amostra

1,559 nm

Quadro 3: Absorbância das substâncias

Foram feitos os cálculos, sabendo que a amostra padrão tinha a concentração de 100 mg/dL e teve absorbância de 0,627 nm, como mostra o esquema abaixo:

Glicose (mg/dL) = [pic 4]x 100

Como resultado obteve-se a concentração de aproximadamente 249 mg/dL de glicose no plasma analisado.

- CONCLUSÃO

Após a realização do experimento pode-se concluir que a espectrofotometria é um método instrumental colorimétrico eficiente para a dosagem de glicose em plasma.

Notou-se que o plasma analisado apresentava uma hiperglicemia, de acordo com os valores de referência da Organização Mundial da Saúde (OMS).

Não foram repetidos os testes para que houvesse a confirmação da hiperglicemia, pois o resultado outrora encontrado poderia ser um falso-positivo. Isso ocorre devido a erros sistemáticos que interferirão na obtenção de resultados exatos.

REFERÊNCIAS

Zaia, Dimas AM; Zaia, C. T. B. V.; Lichtig, Jaim. Determinação de proteínas totais via espectrofometria: vantagens e desvantagens dos métodos existentes. Química nova, v. 21, n. 6, p. 787-793, 1998.

Dos Reis Remião José Oscar, De Siqueira Antônio João Sá, De Azevedo Ana Maria Ponzio. Bioquímica: guia de aulas práticas. EDIPUCRS, 2003.

Santos, Ana et al. Bioquímica Prática. 2013.

Rang, H. P., M. M. Dale, and J. M. Ritter. Rang & Dale Farmacologia. Rio de Janeiro: Elsevier. 2007(31): 895-896.

World Health Organization. Definition and diagnosis of diabetes mellitus and intermediate hyperglycemia: report of a WHO/IDF consultation. Genebra, World Health Organization, 2006

Skoog, D. A, West, D. M., Holler, F. J., Crouch, S. R. Fundamentos de Química Analítica.São Paulo : Thomson, 2006(28):810

Bergmeyer, Hans-UIrich (Ed.). Methods of enzymatic analysis. Elsevier, 2012.