Contagem em Placa com Diluição Seriada

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Para a preparação do 1g de solo, este foi diluído em 9ml de água destilada, assim utilizou-se o método de diluição seriada, no qual 1ml de cada diluição feita é adicionada em 9ml de água em sequências, repetindo 4 vezes esse processo (10x; 100x; 1000x; 10000x).

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Após a solidificação do meio de cultura nas placas de Petri, na cabine de proteção biológica, foram adicionadas as diluições em diferentes concentrações em placas separadas. Esse processo foi feito utilizando a pipeta para passar o material para o meio, espalhando os microrganismos com a alça de platina esterilizada pelo calor através do bico de Bunsen, a seguir fechando o meio e o armazenando por uma semana.

Prática II: Quantificação de E. coli em água

Para o desenvolvimento foram utilizadas duas amostras de água: de poço e de arroio (Sanga da Bica – São Gabriel, RS), desenvolvendo um meio de cultura líquido. Utilizamos para esse 0,85g de caldo Lauril Triptose para 8ml de água destilada. Os procedimentos para preparação do meio de cultura foram semelhantes ao da prática I.

O método de diluição seriada foi feito através de amostras de 1ml, 0,1ml e 0,01ml, sendo cada concentração posta em 3 tubos Falcom. Esse material foi levado para a incubação por 48h a 44ºC.

RESULTADOS E DISCUSSÕES

Prática I: Contagem em placa com diluição seriada

Fazendo o método de contagem em placa, obtivemos os seguintes resultados baseados no número de UFC (unidades formadoras de colônia) por grama de solo:

MORFOLOGIA DAS BACTÉRIAS Nº UFC/g de solo

Vermelha; circular; pequena

7x10000x40=28x10^5

Laranja; circular; grande

1x10000x40= 400000= 4x10^5

Laranja; circular; pequena

15x10000x40= 6x10^6

Amarela; circular; grande

1x10000x40= 4x10^5

Amarela; circular; média

3x10000x40= 12x10^5

Amarela; circular; pequena

7x10000x40=28x10^5

Branca; circular; pequena

40x10000x40= 16x10^6

Branca; circular; média

14x10000x40= 56x10^5

MORFOLOGIA DOS FUNGOS Nº UFC/g de solo

Preto; circular; médio

7x10000x40= 28x10^5

Preto; circular; pequena

5x10000x40= 20x10^5

Cinza; circular; média

4x10000x40= 16x10^5

Cinza; circular; pequena

3x10000x40= 12x10^5

Branco; amorfo; muito grande

1x10000x40= 4x10^5

Os tamanhos apresentados na contagem foram baseados nas medidas a seguir:

Pequeno

Abaixo de 0,3cm

Médio

De 0,4cm a 0,9cm

Grande

A partir de 1cm

Com base nesses dados, foi identificado a maior diversidade de bactérias em relação a diversidade dos fungos, visto que, como mencionado anteriormente, as bactérias estão presente em maior biodiversidade na natureza, sendo possível analisar esse resultado nas aulas práticas. Também observamos que as colônias pequenas são mais observadas no meio de cultura. Essa prática indica que as bactérias estão presentes em altas quantidades no solo e os fungos estão presentes em menor quantidade. Os fungos são de fundamental importância para a decomposição dos compostos presentes no solo e as bactérias podem agir junto aos fungos como decompositoras ou no ciclo do nitrogênio, fixando no solo, beneficiando a fertilidade desse solo.

Prática II: Quantificação de E. coli em água

Após 3 dias, os meios de cultura que apresentavam água de poço e de arroio armazenados em tubos Falcom foram agitados e as duas amostras apresentavam uma espuma amarelada indicadora da presença da bactéria E. coli. Porém, a amostra que continha água de arroio apresentava maior quantidade dessa espuma, indicando maior presença de coliformes em sua composição. Esse fator indica que essa água não é apropriada para banho ou consumo devido a alta presença de coliformes nessa água, indicando poluição através de fezes.

CONCLUSÃO

Prática I

A atuação das bactérias no ambiente é extremamente importante para a reciclagem de matéria orgânica, as bactérias, juntamente com os fungos, realizam o processo de decomposição transformando a matéria orgânica morta e devolvendo-a ao solo sob a forma de matéria inorgânica. Outro aspecto importante, no âmbito ecológico, se refere ao ciclo do nitrogênio, pois os seres vivos não absorvem este elemento químico diretamente do ar e as bactérias fixam esse elemento nos alimentos presentes nas plantações que virão para consumo humano. Como visto na prática I, o solo da amostragem era rico em bactérias e fungos, indicando a boa condição para plantio e uso na natureza.

Prática II

Para avaliação das condições sanitárias da água, utilizam-se bactérias do grupo coliforme, que atuam como indicadores de poluição fecal, pois estão sempre presentes no trato intestinal humano, sendo