TITULO DO EXPERIMENTO: MEIOS DE CULTURA E TÉCNICAS DE SEMEADURA

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Após o aquecimento foram feitas rolhas com gazes e algodão e envolvidos na boca do balão volumétrico com a vedação de fita parafilm na gaze, e em seguida envolvido papel alumínio e amarrado o barbante para completa proteção. Para produção de meio de cultura liquido foram realizados os mesmos procedimentos que do meio de cultura sólido, exceto a técnica de aquecimento no bico de Bunsen. Em seguida foi encaminhado para procedimento de autoclave, que é método feito através do vapor de água sob pressão para esterilização de diversos materiais e utensílios.

Para o processo de autoclave é necessário alguns cuidados: portanto primeiramente foi verificado o nível de água, que deve estar abaixo do cesto, após a verificação foram colocados os materiais para autoclavar, foi fechado o aparelho de autoclave e ligado a chave no máximo, depois aguardou sair jato de vapor e a válvula foi fechada. Após fechamento da válvula pode se observar o aumento da pressão, assim que o ponteiro marcou 121° graus foram marcados 15 minutos e foi realizada a diminuição na voltagem do aparelho de autoclave na temperatura media e aguardou-se 15 minutos para realizar a abertura da autoclave, ou seja, chegar a temperatura ambiente para o manuseio.

Em seguida foi realizada a esterilização da bancada com álcool 70 para possíveis riscos de contaminações bacterianas. Foram abertos os frascos e com auxilio de uma placa de Petri fez-se a homogeneizar do meio de cultura sólido, em seguida o meio foi fechado e agitado em forma de S, e aguardou se alguns minutos para sua solidificação.

Após estes procedimentos a alça da agulha bacteriológica foi flambada no bico de Bunsen, coletou-se uma colônia bacteriana e a transferiu para uma placa de Petri em movimentos estriado simples, ou seja, quando a estria é realizada em movimento de zig zag (estria sinuosa).

Nos procedimentos de meio de cultura liquido foi utilizado o swab para esfregaço em uma moeda e celular para verificar o crescimento das colônias bacterianas. Logo depois o material foi reservado e incubado na estufa com 37 º C, durante 48 horas para análise posterior.

Sabemos que para execução de uma boa semeadura, certas precauções especiais devem ser observadas e tomadas com o fim de preservar os meios de cultura e minimizar os riscos de infecção ou intoxicação no Laboratório:

√ Alça de platina utilizada para semear, deve ser flambada antes e depois da semeadura;

√ Os tubos ou recipientes com meios de cultura, estéreis ou com material a ser inoculado, deverão ser abertos ou manipulados, somente na proximidade da chama do bico de Bunsen;

√ As manipulações devem ser feitas, preferencialmente, por trás da chama do bico de Bunsen;

√ Nunca abrir ou deixar aberto verticalmente os tubos ou frascos com culturas, incliná-los;

√ Tratar de dispor o material de trabalho em posição adequada à fácil manipulação, sem riscos de acidentes ou trocas. Manter os tubos, alças e agulhas sempre na posição vertical, em suportes e estantes apropriadas;

RESULTADOS

Na observação realizada com os meios de cultura pode-se observar que alguns foram contaminados, por não terem sido realizados de maneira adequada na hora do processo de esterilização ou por contaminação de outros meios. Houve a proliferação de algumas colônias e algumas tiveram sua cor substituída por amarelo claro e escuro.

Na analise realizada com swab para esfregaço do celular e da moeda de dois dos alunos presentes, pode se observar que teve a proliferação de grande quantidade de bactérias.

CONCLUSÃO

A identificação da maioria dos microrganismos depende da descrição de suas características morfológicas, fisiológicas, bioquímicas e antigênicas. Através das observações realizadas no laboratório foi possível identificar os diferentes meios de cultura e modo como se prepara um meio, a fim de que se possa cultivar e manter microrganismos em laboratório.

Pude concluir que todos os cuidados devem ser tomados no processo de realização de meio de cultura e também na hora da realização de técnicas de semeadura, pois se não forem realizados da maneira correta poderá acarretar em contaminação dos meios.

Foi possível ter uma compreensão de como são realizadas as principais técnicas de semeadura de bactérias tanto em meios (líquidos e sólidos) quanto nos tubos de ensaio e nas placas de Petri e também realizar a identificação e execução de técnicas de assepsia em um laboratório.

REFERÊNCIAS

Biomedicina Padrão. Técnicas de semeadura. Disponivel em: http://www.biomedicinapadrao.com.br/2012/09/tecnicas-de-semeadura.html. Acesso em: 18 de março de 2017.

Toda biologia.com. Micro-organismos. Disponível em: http://www.todabiologia.com/microbiologia/microorganismos.htm. Acesso em: 20 de Março de 2017.

Universidade Federal De Juiz De Fora. Meios de Culturas Usados Laboratório. Disponível em: http://www.ufjf.br/microbiologia/files/2012/11/Meios-de-cultura-usados-no laborat%C3%B3rio-e-colora%C3%A7%C3%B5es.pdf. Acesso em: 22 de março de