A IMUNOLOGIA CLÍNICA UM RELATO

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PRÁTICAS CLÍNICAS

- REAÇÃO ANTÍGENO - ANTICORPO

Teste realizado para estabelecer o grupo sanguíneo de acordo com o sistema ABO e verificar a compatibilidade entre o sangue do doador e do receptor antes da transfusão.

Material : Lâmina de vidro, lancetas, kit de tipagem sanguínea, algodão, álcool 70%

Metodologia: Após a correta antissepsia do dedo indicador, proceder com a coleta do sangue venoso, coletar 3 gotas de sangue venoso e depositar na lâmina, colocar uma gota de reagente na lâmina á temperatura ambiente (20° a 25°C), misturar o reagente com a suspensão em uma área de 2x2 cm. Movimentar gentilmente a lâmina para promover a mistura e examinar a presença ou não de aglutinação. Os testes que não apresentarem aglutinação deverão ser observados por 2 minutos e não mais. Não interpretar secagem periférica como aglutinação.

Diagnóstico: Na tipagem direta, se ocorrer aglutinação quando as hemádo paciente forem misturadas com o anti-soro A, o antígeno A está presente e o sangue é tipado como A. Se ocorrer aglutinação quando as hemácias do paciente forem misturadas com anti-soro B, o anti-soro B está presente e o sangue é tipado como B. Se ocorrer aglutinação em ambas as misturas, tanto antígenos A e B estão presentes e o sangue é tipado como AB. Se não ocorrer aglutinação em qualquer uma das misturas, não há antígenos presentes e o sangue é tipado como O.

Questões

1- O que são ‘antígenos do grupo ABO’ e onde são encontrados? Faça um esquema ou diagrama ilustrando a distribuição desses antígenos nos diferentes grupos sanguíneos do sistema ABO.Os antígenos do sistema ABO são produtos dos genes ABO localizados no cromossomo 9 de humanos.

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2- O que é hemaglutinação e como ela ocorre?

É a aglutinação de hemácias devido à fixação de anticorpos a antígenos específicos (dos sistema ABO) presentes na membrana dessas células. Causada quando os antígenos de grupo sanguíneo (organizados em múltiplas cópias na superfície da hemácia) provocam aglutinação das células quando estas sofrem reação cruzada com anticorpos. A reação de aglutinação causada pelos anticorpos contra esses antígenos é chamada de hemaglutinação.

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- – TESTE IMUNOCROMATOGRÁFICO

Determina qualitativamente o HCG para diagnóstico da gravidez.

Material : Kit anti-HCG, Urina, coletor de urina.

Metodologia: Aguardar que os reagentes e as amostras atinjam a temperatura ambiente, colocar a amostra em um tubo ou recipiente apropriado de forma que a tira atinja o nível indicado ao ser imersa (ver desenho abaixo), remover a tira reativa de seu invólucro protetor ( no momento do uso) e imergir a mesma verticalmente no tubo ou recipiente contendo a amostra até atingir a marca indicada, tiras imersas acima do nível indicado induzem resultado falso negativo devido à não migração da amostra com o conjugado e se imersas abaixo do nível indicado podem impedir a migração da amostra através da fita, aguardar o tempo necessário para que a amostra percorra a membrana (normalmente entre 1-2 minutos), retirar a tira do recipiente, colocar sob uma superfície plana e seca, e aguardar entre 3 a 15 minutos para realizar a leitura.

Diagnóstico:

POSITIVO: Aparecerão duas bandas, uma na área teste (T) e outra na área controle (C).

INVÁLIDO: Se não surgir uma evidente banda de cor visível na área do teste (T) e controle (C), ou se não surgir banda no controle (C).

Questões:

1.Qual o princípio do teste imunocromático?

Trata-se de um teste imunocromatográfico que detecta seletivamente a presença da hCG. Reagentes imunológicos secos são dispostos numa membrana e reagem à medida que as amostras migram.A tira é imergida na amostra durante alguns segundos ou coloca-se umas gotas na placa. O teste é depois colocado numa superfície plana. A hCG presente na amostra liga-se ao conjugado coloidal anti-beta hCG formando um complexo antigénio-anticorpo. Este move-se cromatográficamente ao longo da membrana absorvente da tira-teste/placa-teste por acção capilar e vai se ligar aos anticorpos anti-hCG na área da linha teste, determinando o aparecimento de uma linha colorida. Na ausência de hCG não haverá o aparecimento da linha colorida na área teste. A mistura da reacção continua a migrar atingindo a área controlo. O conjugado não ligado ao antigénio (hCG) une-se aos reagentes desta área produzindo outra linha colorida, demonstrando que os reagentes estão funcionando corretamente e que foi adicionando volume suficiente de amostra.

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[pic 11]

Resultado Negativo

Resultado Positivo

Resultado Inválido

Apenas se desenvolve a linha na área de controlo. A amostra não contém um nível aceitável de hCG.

Ambas as linhas, controlo e teste, não se desenvolvem. A amostra contém um nível detectável de hcG.

Nenhuma linha se desenvolve. Repita o teste.

2– TESTE ASLO

Identifica através do anticorpo antiestreptolisina O a presença da proteína presente na bactéria Estreptococo beta hemolítico do grupo A.

MATERIAL: Cartão teste, microscópio , pipetas semiautomáticas de 50 µl , ponteiras amarelas , palitos de plástico , cronômetro , estantes/grades , amostras de pacientes (soro positivo e soro negativo) , kit de ALSO , solução de salina (0,9 %).

METODOLOGIA: * Prova qualitativa: Deixar que os reagentes e amostras adquiram a temperatura ambiente, adicionar uma gota (0,05 mL) da amostra e uma gota dos controles positivo