Atividade Prática Supervisionada Apresentado ao Instituto de Ciências da saúde da Universidade Paulista

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As análises colorimétricas consistem em uma metodologia química analítica que mensura a intensidade de luz emitida por um determinado reagente indicando a concentração de determinada molécula ou partícula, ou seja, o reagente somado a molécula se torna colorido e essa intensidade de cor é capturada pelo equipamento. Tal análise é realizada utilizando-se um equipamento conhecido como espectrofotômetro.

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Campos elétricos e magnéticos oscilantes

3. FOTOMETRIA DE CHAMA

A fotometria de chama é a mais simples das técnicas analíticas baseadas em espectroscopia atômica. Apesar da simplicidade da técnicas diversos conceitos importantes estão envolvidos no desenvolvimento de experimentos usando a fotometria de chama, desde os princípios de espectroscopia ate a estastiisticas no tratamento de dados, passando por preparo de amostra e eliminação de interferências . a amostra contendo cátions metálicos é inserida em uma chama e analisada pela quantidade de radiação emitida pelas espécies atômicas ou iônicas excitadas. Os de uma chama, geram espécies excitadas que, ao retornarem para o estado fundamental, elementos, ao receberem energia liberam parte da energia recebida na forma de radiação, em comprimentos de onda característicos para cada elemento químico .

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4. Eletrodo íons seletivos

São eletrodos de membrana que respondem seletivamente a alguns íons em presença de outros. Um eletrodo de íon seletivo mede o potencial de um especifico em solução. Por exemplo, o eletrodo de PH é um eletrodo de íon seletivo para o íon hidrogênio. Ele é composto por um medidor, uma sonda e vários elementos descartáveis usados para ajustes no pH ou concentrações iônicas. Um eletrodo de íons seletivo e composto por uma membrana, usualmente anexada ao fundo de um tubo que contem um eletrodo de referencia interno.

- Mecanismo de resposta dos eletrodos íon seletivos

Os modelos de interface eletrodo solução, apesar de não estarem inteiramente elucidados, contribuem para compreensão do mecanismo de funcionamento dos eletrodos íon seletivos. Processos eletroquímicos freqüentemente se dividem em processos parciais caracterizados por suas velocidades, as quais são limitadas pela resistência ao processo. Nesses processos, ocorrem acumulo de cargas em camadas, que podem ser representadas como capacitores. O mecanismo de trabalho dos sensores íon seletivo podem ser interpretados a luz dos conceitos citados anteriormente, sobre as medidas potenciométricas e modelos de interface eletro solução.

5. QUIMILUMINESCÊNCIA

Quimiluminescência é a produção de radiação luminosa eletromagnética ( inclusive ultravioleta ou infravermelho ) por uma reação química. Quando esta radiação é emitida a partir de um sistema químico presente num organismo ou dele derivado, acaba sendo conhecida como bioluminescência. O processo químico da quimiluminescência envolve a absorção, pelos reagentes, de energia suficiente para geração de um complexo ativado , o qual se transforma em um produto eletronicamente excitado, se esta espécie excitada for emissiva, produz a radiação diretamente, caso contrario pode ocorrer a transferência de energia do estado estado excitado formando uma molécula aceptora apropriada, resultando na emissão indireta da radiação.

Quimiluminescência e suas vantagens – útil em dosagem de marcadores tumorais PSA, CA-125, CA 15-3, CA-19-9, CEA, AFP , Hormônios , doenças infecciosas (HIV,Hepatites,).

5.1 ELETROQUIMIOLUMINESCÊNCIA

É uma espécie de luminescência produzida a partir de reações eletroquímicas em soluções. Na eletroquimioluminescência, os intermediários eletroquimicamente gerados sofrem uma alta reação exergônica para produzir um estado eletronicamente excitado que, então, emite luz.Tal excitação ocorre devido à transferência de elétrons energéticos , reações de espécies eletrogeradas. Essa é uma forma de quimioluminescência onde um ou todos os reagentes são produzidos eletroquimicamente sobre eletrodos. A eletroquimioluminescência é muito útil em aplicações analíticas como um método altamente delicado e seletivo. Combina as vantagens analíticas da análise quimioluminiscente (ausência de sinal óptico de fundo) com a facilidade de controlar a reação por aplicação de potencial do eletrodo.

- ENSAIO IMUNOEZINATICO

ELISA ou ensaio de imunoabsorção enzimática é um teste imunoenzimático que permite a detecção de anticorpos específicos (por exemplo, no plasma sanguíneo). Este teste é usado no diagnóstico de várias doenças que induzem a produção de imunoglobulinas.Este teste utiliza antígenos virais (proteínas) produzidos em cultura celular (testes de primeira geração) ou por meio de tecnologia molecular (recombinantes). Os antígenos virais são absorvidos nas cavidades existentes das placas de plástico dos kits, onde o soro do paciente é adicionado a seguir. Se o soro possuir anticorpos contra o HIV, estes se ligarão aos antígenos (proteínas do HIV). Tal fenômeno pode ser verificado com a adição de reagente. Em caso positivo, ocorre uma reação corada ao se adicionar um substrato. Essa técnica é amplamente utilizada como teste inicial para detecção de anticorpos contra o vírus.

6.1 MARCADORES TUMORAIS

É uma substância presente no tecido tumoral, no sangue ou em outros fluidos biológicos, que em resposta à presença do tumor. É importante que esta substância possa ser utilizada para diferenciar tecidos normais de neoplásicos e que possa ser caracterizada ou quantificada por procedimentos relativamente práticos. A dosagem de alguns hormônios também pode ser utilizada para a detecção determinados tumores. O envolvimento dos hormônios como marcadores tumorais pode ocorrer de duas maneiras distintas, por produção aumentada pelo tecido endócrino normalmente produtor ou pela produção ectópica, por tecido normalmente não produtor de hormônios. Estas duas formas podem ser exemplificadas pelo hormônio adrenocorticotrófico (ACTH) presente tanto no de tumor da hipófise quanto no tumor de células pequenas do pulmão. Determinados antígenos presentes na superfície da célula neoplásica, tais como CA 125, CA 15-3 e CA 19-9, podem ser utilizados como marcadores tumorais e, em geral,