Espectrofotometria

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- METODOLOGIA

- Informações do produto

Tabela 1 - Dados do Produto.

Produto e Marca

Mistura pronta para Vatapá e Carurú - Kerus

Peso Utilizado

300g

Validade

12 meses

Empresa Fabricante

Kerus Indústria e Comércio Ltda.

Cidade/Estado

Feira de Santana/Bahia

Ingredientes

Farinha de mandioca, amendoim, castanha de caju e camarão.

Independentemente do tipo de avaliação microbiológica, o procedimento iniciou-se com o preparo das diluições para análise, utilizando sempre 25g do produto, coletadas em um erlenmeyer de 250mL contendo 225mL de água peptonada, preparando assim, após a homogeneização, a diluição 10-1. A partir da mesma preparou-se também, em tubos de ensaio contendo água peptonada, as diluições 10-2 e 10-3.

2.2. Análises Microbiológicas

2.2.1 Determinação do NMP de Coliformes (Teste presuntivo)

O objetivo é detectar, no produto, a presença de grupos de bactérias indicadoras de contaminação. Foram inoculadas 1mL de cada diluição em três tubos de ensaio (cada diluição), cada tubo de ensaio continha 9mL de caldo LST (Lauril Sulfato Tripftose). Cada tubo continha um tubo duhram invertido. Os tubos foram incubados em estufa por 35°C durante 24 horas.

2.2.2 Determinação do NMP de Coliformes Totais e Termotolerantes

Os tubos do teste presuntivo que mostraram presença de gás em quantidade aceitável determinaram uma leitura positiva de coliformes e foram eles os utilizados para determinar coliformes totais e termotolerantes. Foi inoculado 1mL do(s) tubos(s) em seis tubos de ensaio: três deles contendo, em cada, 9mL de caldo VBBL (Lactose Bile Verde Brilhante) para determinação de coliformes totais e nos outros três continham, em cada, 9mL de caldo EC (Escherichia Coli) para determinação de coliformes termotolerantes. A inoculação dos tubos contendo VBBL foi 35°C por 24-48 horas, já a dos tubos contendo caldo EC foi 44,5°C por 24 horas.

2.2.3 Contagem Total de Mesófilos e Termófilos Aeróbios

Utilizando a técnica de plaqueamento por profundidade, adicionou-se 1mL de cada diluição em cada placa (quatro para cada diluição) e logo em seguida adicionou-se o ágar PCA (Plate Count Agar). A inoculação ocorreu de forma que duas placas de cada diluição foram submetidas à 35°C para análise de mesófilas e as outras duas à 55°C para análise de termófilas, todas por 24-48 horas.

2.2.4 Contagem de Estafilococos Coagulase Positiva

Utilizando a técnica de plaqueamento por superfície foi adicionado 0,1mL de cada diluição em cada placa contendo o Ágar BP (Baird Parker), submetidas à 35°C durante 24-48 horas.

2.2.5 Contagem de Bacillus Cereus

Inoculou-se 01,mL de cada diluição a cada duas placas contendo Ágar MYP (Manitol Gema Polimixina) pelo método de plaqueamento por superfície. As placas foram submetidas à 35°C durante 24-48 horas.

2.2.6 Contagem de Bolores e leveduras

Pelo método de plaqueamento por superfície, inoculou-se 0,1mL de cada diluição em meio Ágar BDA (Batata Dextrose Acidificado). As placas foram submetidas à 25°C por 5 à 7 dias.

2.2.7 Determinação de Salmonella

A determinação de Salmonella ocorreu por meio do pré-enriquecimento de 25g da amostra em 225mL de caldo lactosado, que foi incubada à 35°C por 24 horas. Com o pré-enriquecimento, inoculou-se 1mL em um tubo contendo o caldo TT (Tetrationato), para o enriquecimento seletivo, e 1mL em um tubo contendo o caldo RV (Rappaport-Vassilidis) para o plaqueamento seletivo; ambos também foram incubados à 35°C por 24 horas. Utilizando ambas amostras, foi inoculado 0,1mL de cada uma, separadamente, em quatro meios de cultura: Ágar XLD, Ágar VB, Ágar RAMRACH e Ágar HE. As placas foram incubadas à 35°C por 24 horas.

2.2.8 Contagem de Clostridium

Pelo método de plaqueamento por superfície, inoculou-se 0,1mL de cada diluição em meio Ágar TSC (Triptose Sulfito Cicloserina). A incubação foi em anaerobiose por 46°C durante 24-48 horas.

- RESULTADOS E DISCUSSÕES

O produto escolhido para a análise foi a mistura pronta para vatapá e caruru, e de acordo com a RDC nº 12 no MAPA, o produto é encontrado no Anexo 1, na categoria 12 (Produtos a serem consumidos após adição de líquido, com emprego de calor), fornecendo parâmetros comparativos que possibilitam a análise microbiológica para Bacillus Cereus, Coliformes a 45ºC e Salmonella sp. A Tabela abaixo (Tabela 2) traz os resultados obtidos nas análises microbiológicas feitas aulas práticas das seguintes análises: Coliformes Totais e Termotolerantes, para essa foi apenas feito o teste presuntivo, Bolores e Leveduras, Contagem de Mesófilos e Termófilos, Bacillus Cereus, Estafilococcus Coagulase Positiva, Colistridium e a presença ou ausência de Salmonella sp.

Tabela 2 – Resultados das análises microbiológicas da amostra de mistura para vatapá.

Microrganismos

Diluição

Resultados

Legislação

10-¹

10-²

10-³

Coliformes Totais e Termotolerantes

3

0

0

23NMP/g

102

Mesófilos

68/65

6,65×104UFC/g