Relatorio Microbiologia

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- Objetivo:

O procedimento de semeadura bacteriana é importante para a execução da maior parte dos exames microbiológicos. A aula também deve abordar a questão da seletividade dos meios de cultura.

- Métodos:

- Com a alça bacteriológica devidamente esterilizada, coletou-se amostras de bactérias;

- Utilizando a técnica do esgotamento do inóculo por estrias (Figura 1), foi semeado a amostra de bactérias nos Ágar MacConkey e Manitol Salgado.

- Incubou-se os meios de cultivo sólidos.

- Posteriormente observou-se as características das colônias que cresceram no ágar MacConkey e no Manitol Salgado (Figura 2 e 3).

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Figura 3: Manitol salgado

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- Resultados:

Algumas colônias no Ágar MacConkey apresentaram coloração rosada, amarelada ou incolores, odor forte, colônias grandes, brilhantes.

O manitol é fermentado pelo S. aureus, o Sal inibe o crescimento da maioria dos microrganismos.

- Conclusões:

Um isolamento bem feito é fundamental no processo de identificação das bactérias, visto que a área de isolamento é fundamental para o desenvolvimento dos passos seguintes de identificação.

O Manitol Salgado e MacConkey são exemplos de meio de cultura que podem ser usados num primeiro passo de identificação das mesmas, visto que o Manitol Salgado é utilizado para o isolamento seletivo de estafilococos e para a detecção de Staphylococcus aureus provenientes de amostras, e o Agar Maconkey como um meio seletivo e diferencial na suspeita de uma bactéria.

- Prática 2 - Coloração de Gram

- Introdução:

A coloração de Gram é um método de coloração de bactérias desenvolvido pelo médico dinamarquês Hans Christian Joachim Gram (1853 - 1838), em 1884, e que consiste no tratamento sucessivo de um esfregaço bacteriano, fixado pelo calor, com o reagente cristal violeta, lugol, álcool-acetona e fucsina básica. Essa técnica permite a separação de amostras bacterianas em Gram-positivas e Gram-negativas e a determinação da morfologia e do tamanho das amostras analisadas. A coloração de Gram é um dos mais importantes métodos de coloração utilizados em laboratórios de microbiologia e de análises clínicas, sendo quase sempre o primeiro passo para a caracterização de amostras de bactérias. A técnica tem importância clínica uma vez que muitas das bactérias associadas a infecções são prontamente observadas e caracterizadas como Gram-positivas ou Gram-negativas em esfregaços de pus ou de fluidos orgânicos. Essa informação permite ao clínico monitorar a infecção até que dados de cultura estejam disponíveis. É possível a análise de vários esfregaços por lâmina, o que facilita a comparação de espécimes clínicos. As lâminas podem ser montadas de forma permanente e preservadas como documentação.

- Objetivo:

- Métodos:

- Resultados:

- Conclusões:

- Práticas 3 e 4 – Catalase

- Introdução:

O teste da catalase é realizado com peróxido de hidrogênio (H2O2) sobre uma lâmina e consiste na detecção da enzima catalase em bactérias. Esta enzima atua sobre a água oxigenada (peróxido de hidrogênio 3 a 5%) desdobrando-a em oxigênio e água e conseqüentemente protege as bactérias dos ataques com superoxidantes produzidos como defesa pelos leucócitos. A catalase é produzida por muitos microrganismos e é usualmente empregada para diferenciar Staphylococcus, que são catalase positivos de Streptococcus, que são catalase negativos. A prova é considerada positiva quando há borbulhamento ou efervescência devido à liberação do oxigênio.

- Objetivo:

É utilizada para diferenciar entre Staphylococcus e Streptococcus.

- Materiais:

- placa semeada com microbiota da garganta

- esfregaço

- bico de bunsen

- lâmina

- peróxido de hidrogênio

- Métodos:

- Em uma sala de coleta levamos o paciente e pedimos para ele abrir bem a boca.

- Com um palito seguramos a língua do paciente para não comprometer com saliva o conteúdo coletado.

- Com um swab nós passamos atrás do sino da garganta, tomando o cuidado para não encostar na parede da boca ou na língua.

- Passamos o swab na placa e deixamos crescer os microrganismos ali presentes.

- Esteriliza-se a lâmina e o esfregaço

- Passamos o esfregaço na placa semeada, removendo uma colônia e adicionando na lâmina.

- Colocamos uma gota de peróxido de hidrogênio.

- Resultados:

Foram feitos 5 testes e foi encontrado a presença de bolhas em 3, ou seja, catalase positiva (Staphylococcus). E catalase negativa (Streptococcus) em 2, não havendo formação de bolhas.

- Conclusões:

A catalase positiva consiste na presença de bolhas assim que adicionado o peróxido de hidrogênio, no caso do Staphylococcus. A catalase negativa não há presença de bolhas, no caso de Streptococcus. As bolhas aparecem por causa da liberação de oxigênio da reação.

- Prática 5 - Urease

- Introdução:

Enzimas são proteínas especificas para catalisar reações químicas, principalmente reações biológicas, elas aceleram significativamente as reações e não são consumidas nas