A Determinação de proteínas pelo método Kjeldahl

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2. OBJETIVO GERAL

Realizar determinação de proteínas pelo método Kjeldahl.

3. MATERIAL E MÉTODO

3.1. Material

- Balões de Kjeldahl;

- Sistema de digestão;

- Sistema de destilação;

- Elernmeyer de 250mL;

- Bureta de 50mL com suporte;

- Pipeta volumétrica de 25ml;

- Ácido sulfúrico concentrado;

- Hidróxido de sódio 1:1;

- Indicador misto (azul de metileno e vermelho de metila);

- Ácido Bórico 2,0%;

- Catalisadores: Sulfato de potássio e sulfato de cobre.

3.2. Método

DIGESTÃO:

- Pesou-se de 0,2 a 0,5g da amostra no balão de Kjeldahl;

- Adiciou-se 6mL de ácido sulfúrico e cerca de 2g da mistura catalítica;

- Levou-se ao aquecimento digestão, subindo a temperatura progressivamente: posição 2 – 30min, posição 3 – 1h, posição 5 – 30min, posição 6 até a solução se tornar azul esverdeada e livre de material não digerido (pontos pretos);

- Deixou-se esfriar.

DESTILAÇÃO

- Transferiu-se quantitativamente o material do balão para o frasco de destilação e adicionou-se 50mL de água;

- Ligou-se imediatamente o balão ao conjunto de destilação;

- Em um elernmeyer de 250mL, adicionou-se 30mL de ácido bórico, 50mL de água e 3 gotas de indicador misto e acoplou-se no sistema de destilação;

- Ligou-se o equipamento e esperou-se a solução iniciar a fervura;

- Adicionou-se cuidadosamente e vagarosamente 20mL solução de hidróxido de sódio 1:1 na extremidade superior do equipamento até garantir um ligeiro excesso de base;

- Aqueceu-se à ebulição e destilou-se até obter cerca o dobro do volume da solução de ácido bórico colocada no elernmeyer (250-300) mL.

TITULAÇÃO

- Titulou-se a solução do elernmeyer com HCL 0,099 M até o ponto de viragem.

4. RESULTADOS E DISCUSSÃO

4.1. Resultados

Os resultados obtidos do peso da amostra e o volume gasto na titulação estão descritos abaixo na Tabela 1, juntamente com o resultado da % de proteína.

Tabela 1: Peso Inicial da Amostra, Volume Gasto de HCl e Percentual (%) de Proteína.

Peso inicial da amostra

Volume gasto na titulação (HCl)

% de proteína na amostra

0,356 g

4,5 mL

10,21

A fórmula utilizada para o cálculo de proteína na amostra é:

% Proteína = V * M* 0,014* F* 100/ P

Onde V é o volume gasto de HCl na titulação, M a molaridade do HCl, F fator de conversão de nitrogênio para proteína e P o peso inicial da amostra. O valor aplicado para o fator de conversão foi de 5,83, conforme indicado da professora desta disciplina.

4.2. Discussão

Com base nos resultados obtidos observa-se um percentual de valor inferior ao apresentado pelo referencial teórico, o que pode ser ocasionado por erros, provenientes de fatores externos, nos processos utilizados para mensuração do teor de proteína (digestão, destilação e titulação), ou ainda por erros de analítica no aferimento dos dados do experimento, contudo o resultado obtido se mostra favorável ao se analisar outros referenciais teóricos utilizados em estudos de sala de aula que estabelece um valor de 9,8 á13,5.

5. CONCLUSSÃO

O experimento mesmo não apresentando os valores esperados pelo referencial teórico utilizado demostraram-se satisfatórios pois a margem da diferença apresenta é relativamente baixa, ainda sobre a diferença de valores se mesma for comparada com o referencial utilizado em sala de aula encontram-se dentro do parâmetro estabelecido.

6. REFERÊNCIAS

ANDRADE, E.C.de. Análise de Alimentos: